بررسی اثرات ضد التهابی و ضد آنژیوژنز نالوکسان در مدل التهابی Air Pouch در موش صحرایی نر

Abstract

شواهد رو به گسترشی وجود دارد که سیستم عصبی در تعامل دو طرفه با سیستم ایمنی است.جهت مطالعه ارتباط بین دو سیستم اپیوئیدی و ایمنی، اثر ضدالتهابی نالوکسان در مدل التهابی air pouch به عنوان مدل حیوانی آرتریت روماتوئید مورد بررسی قرار گرفت.هدفهدف از این مطالعه ارزیابی اثرات نالوکسان بر پارامترهای التهابی و آنژیوژنز در مدل التهابی air pouch در موش صحرایی نر است.روش کارهوای استریل (20و 10 میلی لیتر) در پشت حیوان بیهوش در روزهای 1 و3 زیرجلدی تزریق گردید. روز ششم کاراژنین داخل pouch تزریق شد. نرمال سالین و نالوکسان بلافاصله، 24 و 48 ساعت بعد از تزریق کاراژنین به ترتیب در گروه کنترل و درمان تزریق گردید. پس از 72 ساعت بافت گرانولوما باز شد و مایع pouch برای تعیین حجم اگزودا و شمارش لکوسیت جمع آوری شد. بافت گرانولوما، خارج و توزین شد. غلظت VEGF وIL-1 اگزودا تعیین مقدار گردید. برای تعیین آنژیوژنز، بافت گرانولومای هموژنیزه شده و سانتریفوژ شد و مایع رویی به وسیله فیلترهای 22/0 میکرونی صاف گردید. غلظت هموگلوبین توسط کیت هموگلوبین تعیین مقدار شد.یافته هانالوکسان به صورت معنی داری پارامترهای التهابی از جمله تجمع لکوسیتی (p<0.01)، حجم اگزودا (p<0.001)، وزن بافت گرانولوما (p<0.01) را کاهش داد. میزان VEGF و IL-1 به صورت معنی داری (P<0.01) و (P<0.001) کاهش یاف ت. میزان هموگلوبین بافت گرانولوما به عنوان شاخص آنژیوژنز به صورت معنی داری (p<0.001) کاهش یافت.نتیجه گیریاین مطالعه نشان می دهد نالوکسان قادر است پارامترهای التهابی و آنژیوژنز را در مدل التهابی air pouch به طور وابسته به دوز کاهش دهد. احتمالاً اثر ضد التهابی به واسطه مهار تجمع لکوسیتی در نتیجه کاهش غلظت سایتوکاین های التهابی در اگزودای مترشح می باشد. , Background A bidirectional interaction between the nervous and immune systems was becoming increasingly well documented. The aim of the present study was to evaluate the effect of naloxone on the inflammatory parameters in a rat model for rheumatoid arthritis, namely air pouch model of inflammation.Aim The aim of the present study was to evaluate the effects of naloxone on the inflammatory parameters and angiogenesis in the air pouch model of inflammation.Methods Rats were anesthetized, 20ml and 10ml of sterile air were injected subcutaneously on the back on day 1 and 3, respectively. On day 6, carrageenan was injected into pouch. Saline as control and naloxone as treatment were administered intra pouch at the same time as the carrageenan injection, 24h and 48h after inflammation induction. After 72h, the rats were sacrificed, the pouch was opened and pouch fluid was collected in order to determine exudate volume and leukocyte count. The granulated tissue was dissected out and the weight determined. VEGF and IL-1 levels of exudate were determined with ELISA kit. For determination of angiogenesis, granoluma tissue was homogenized and centrifuged and the supranatant was filtered through a 0.22µm filter and the hemoglobin concentration determined, using a hemoglobin kit.Results Naloxone decreased significantly volume of exudate (P<0.01), leukocyte accumulation (P<0.001) and tissue weight (P<0.01). In addition angiogenesis, VEGF and IL-1 level were makedly decreased (P<0.001) , (p<0.01) and (p<0.001).Conclusions The results suggest the anti-inflammatory and anti-angiogenesis properties of naloxone in the air pouch model of inflammation that this reduction probably is related to inhibition of leukocyte accumulation and reduction of cytokine concentrations.