فرمولاسیون نانو لیپوزوم و نانواتوزوم‌ حاوی فلوکونازول و ارزیابی اثرات ضد قارچی آنها

Abstract

مقدمه و پیشینه مطالعاتی مخمرهای کاندیدا آلبیکانس قارچهای فرصت طلبی هستند که مشکلات مهمی برای بیماران مبتلا به ضعف سیستم ایمنی بوجود می آورند. با استفاده وسیع الطیف فلوکونازول در این گروه از بیماران، میزان بروز بیماری کاهش یافته است. فلوکونازول یک عامل ضد قارچی بیس تری آزولی با طبیعت هیدروفیل و پروتئین بایندینگ کم و عارضه هپاتیت کبدی در مصرف طولانی مدت می باشد. نانوذرات اتوزومی و لیپوزومی به عنوان حامل های لیپیدی نوین برای افزایش اثرات ضد قارچی معرفی شده اند.هدف ارائه فرمولاسیونی موثر برای فلوکونازول جهت افزایش اثرات ضد قارچی دارو می باشد.روش کار نانواتوزومها و نانولیپوزومهای حاوی فلوکونازول به ترتیب به روش‌ تزریق حلال و هیدراسیون لایه نازک تهیه شدند. سپس ارزیابی های اندازه ذره‌ای، درصد و ظرفیت بارگیری، پتانسیل زتا و SEM و درصد رهایش و میزان نفوذ به دیواره سلولی قارچی و ارزیابی اثرات ضد قارچی به روش رقیق سازی متوالی انجام شد. یافته ها لیپوزومها و اتوزومها به ترتیب دارای اندازه و درصد بارگیری و پتانسیل زتای میانگین 99 و 114 نانومتر و 98 % و 67 % و29/7- و 48/3+ میلی ولت و در مطالعات میکروسکوپی دارای شکل کروی بودند. میزان رهایش فلوکونازول از فرمولاسیون اتوزومی و لیپوزومی در 48 ساعت به ترتیب برابر 91 % و 45 % شد. در مقایسه MIC در غلظت های تقریبا معادل؛ MIC برای محلول استاندارد فلوکونازولی برابر µg/ml 178/0 و اتوزوم برابر µg/ml 875/6 ولی برای لیپوزوم هیچ اثر مهاری مشاهده نشد.نتیجه‌گیری روش بکار رفته منجر به تولید ذرات در سایز نانومتری و بارگیری بالا و پایداری مناسب شده است. نانوذرات لیپوزومی و اتوزومی حاوی فلوکونازول با وجود داشتن خصوصیات فیزیکوشیمیایی مطلوب و نفوذ مناسب به دیواره سلول قارچی اثرات ضد قارچی مطلوب تری در in-vitro نسبت به محلول فلوکونازول نشان ندادند. , Introduction Fungal diseases tend to occur more often as opportunistic infections in patients with a weakened immune system. Candidal infections are also among the most widespread superficial cutaneous fungal infections. Candida Albicans is the major human opportunistic pathogens that causes both mucosal and deep tissue infections. Fluconazole is an oral synthetic bis-triazole compound effective in the treatment of mucosal and cutaneous forms of candidiasis. Fluconazole has some serious side effects in the oral and parenteral dosage forms such as liver and kidney damage. Ethosomes and liposomes were developed as a lipid carriers to improve the antifungal efficiency of various drugs. Aim The present study aimed to develop fluconazole-loaded nano ethosomes and nano liposomes for enhanced antifungal effects. Method Ethosomes and liposomes were prepared by solvent injection method and thin-layer hydration, and characterized for size, polydispersity index (PDI), zeta potential (ZP), entrapment efficiency (% EE), surface morphology and kinetic of release and penetration into cell wall of yeasts. The in- vitro antifungal experiments were performed. Results The developed ethosomes and liposome showed proper characteristics such as mean particle sizes around 114 and 99 nm and EE values of % 67 and % 98, respectively. Also zeta potential was +3.48 and -7.29 mv and release percentage was 45 % and 91 % in 48 hours, respectively. In- vitro antifungal evaluation showed the MIC of 6.875 µg/ml for ethosomes but MIC of liposomes have not detected and for fluconazole was 0.178 µg/ml.Conclusion Although flourecence imaging indicated the proper penetration of nanovesicules into fungal colonies, in vitro antifungal tests did not show the superiority of nanoparticles. It seems that in vivo experiments need to be used for more accurate assessment.