پیش بینی قابلیت نفوذ داروها به مخاط روده انسان با استفاده از متد پرفیوژن روده باریک موش صحراییSPIP

Abstract

هدف از تحقیق حاضر پیش بینی قابلیت نفوذ داروها به مخاط روده باریک انسان با استفاده از روش پرفیوژن روده باریک موش صحرایی و تکنیک کشت سلولی می باشد.روشها ضرایب نفوذ پذیری برای نه دارو در روش کشت سلولی و پانزده دارو در روش پرفیوژن روده باریک موش صحرایی تعیین گردید. برای انجام آزمایش از موش صحرایی نر از نژاد ویستار استفاده شد. بدین ترتیب که ابتدا حیوان با استفاده از تزریق صفاقی پنتوباربیتال (60mg/kg)بیهوش گردید و سپس با ایجاد برش در شکم ، 10 سانتی متر از ژوژنوم کانوله شد.محلوا داروی مورد آزمایش در بافر فسفات سالینه(PBS) از لوله ورودی با سرعت 2/.ml/min وارد و در فواصل زمانی معین تا 90 دقیقه از لوله خروجی نمونه برداری شد. در تمام آزمایشات از فنل رد به عنوان یک مارکر غیر قابل جذب برای تصحیح فلاکس آب استفاده شد. در روش کشت سلول نیز از تک لایه های سلولهای Caco-2 که روی غشاهای نفوذپذیرکشت داده شده اند، استفاده گردید. محلول داروی مورد آزمایش در بافر HBSS به بخش آپیکال تک لایه افزوده و نمونه گیری از بخش بازولترال در دقیقه شصت انجام شد. در تمام طول مدت آزمایش پلیت محتوی تک لایه سلولهادر شیکرانکوباتور 37 درجه (70 دور در دقیقه) قرار گرفت . نمونه های گرفته شده با استفاده از دستگاه HPLC آنالیز و ضرایب نفوذ پذیری داروها با استفاده از فرمول مربوطه محاسبه گردید.