تهیه وخالص سازی کیتین و کیتوزان از پوسته خارجی میگو

Abstract

کیتین ،پلی(بتا(41)2 استامید و2 داکسی Dگلوکوپیرانوز) ماده اصلی تشکیل دهنده اسکلت خارجی سخت پوستان از جمله میگو و شاه میگو می باشد.کیتوزان پلی (بتا(41)2داکسی Dگلوکوپیرانوز)است که از داستیلاسیون قلیایی کیتین حاصل می شود هدف از این پژوهش استخراج کیتین از پوسته خارجی میگوی خلیج فارس با نام علمی (Metapenaeus monoceros)و شاه میگوی رودخانه ارس با نام علمی ( Astacus leprodactylus)وتهیه کیتوزان با درجه داستیلاسیون و وزن ملکولی متفاوت بوده است.استخراج کیتین شامل سه مرحله پروتئین زدائی ،کانی زدائی ،ورنگ بری می باشد.ابتدا پوسته خارجی هر دو نوع میگو شستشو داده شد سپس خشک شدو بعد از اسیاب شدن مورد استفاده قرار گرفت.مرحله پروتئین زدائی با محلول سدیم هیدروکسید35 درصدبا نسبت پوسته خشک به حلال (WV)1:10 در دمای65 درجه سانتی گراد به مدت 2 ساعت انجام شد.سپس پودر حاصل شستشو داده شد و خشک گردید.مرحله کانی زدائی با محلول اسید کلریدریک 1 نرمال با نسبت پودر خشک به حلال ( WV) 1:15 در دمای آزمایشگاه وبه مدت 30 دقیقه صورت گرفت.مرحله رنگبری به دو قسمت استخراج کاروتنوئید با استون پودر خشک به حلال ( WV) 1:10 در دمای آزمایشگاه وبه مدت 5 دقیقه ورنگبری با محلول سدیم هیپوکلریت با نسبت پودر خشک به حلال ( WV) 1:10 در دمای آزمایشگاه وبه مدت 5 دقیقه انجام شد.برای اثبات اینکه ماده به دست آمده کیتین می باشد از طیف گیری FTIR استفاده شد.کیتین حاصل با داستیلاسیون قلیایی به کیتوزان تبدیل می شود بدین منظوراز 5آزمایش با غلظت محلول سدیم هیدروکسید،دما وزمان متفاوت استفاده شد بدین ترتیب کیتوزان بادرجه داستیلاسیون مختلف ووزن ملکولی مختلف (بالا ،متوسط وپایین) بدست آمد.برای بدست اوردن درجه داستیلاسیون کیتوزان از طیف گیری FTIR کمی استفاده شد. وزن ملکولی نمونه های کیتوزان توسط ویسکومتر موئینه بدست امد.ویسکوزیته کاهیده برای محلول های کیتوزان با غلظت های 01 ، 0076 ، 005 ، 0026 ، 001 دراسید استیک 1 محاسبه شد. با رسم نمودار ویسکوزیته کاهیده در برابر غلظت ومحاسبه عرض از مبدا خط حاصل ویسکوزیته ذاتی نمونه های کیتوزان بدست امدوبا استفاده از ویسکوزیته ذاتی معادله معروف Mark Houwink وزن های ملکولی نمونههای کیتوزان محاسبه شد.در مرحله استخراج کیتین درصد کیتین استخراج شده برای میگوی خلیج فارس 16 وبرای شاه میگوی رودخانه ارس19 بدست امد. در مرحله تهیه کیتوزان ،نمونه های کیتوزان با درجه داستیلاسیون 3 تا 995 وبا وزن های ملکولی بالا،متوسط وپایین (از 6127038 تا 2188949 دالتون)بدست آمدند.افزایش غلظت محلول سدیم هیدروکسید،دماومدت زمان واکنش باعث کاهش وزن ملکولی وافزایش درجهداستیلاسیون کیتوزان می شود.