بررسی اثر ایمنی زایی ترکیبrCagAولیپوپلی ساکارید هلیکوباکترپیلوری در مدل موشی .Balb/c

Abstract

هلیکوباکتر پیلوری به عنوان یکی از شایعترین علل عفونت معده در انسان شناخته شده است و حدود نیمی از جمعیت جهان این ارگانیسم را حمل می کند. هدف از این مطالعه تعیین نقش لیپوپلی ساکارید و rCagAهلیکوباکترپیلوری به عنوان پاسخ های ایمنی میزبان تحریک کننده در زمینه واکسن است. روش کار:در این مطالعه تجربی، موش BALB / c با فرمول های مختلف سه بار به صورت خوراکی واکسینه شد و به دنبال آن دو بار به صورت عضلانی (IM) در فواصل 14 روزه. اثرات محافظتی واکسن دو جزء به همراه Adjutant CpG قبل و بعد از ایمونیزاسیون در مطالعات جداگانه مورد بررسی قرار گرفتند. بیان ژن IL-4، IL-10، IL-12 و IFN- در سرم موش های ایمن سازی شده قبل و بعد از ایمون سازی با استفاده از آزمون RT-PCR اندازه گیری شد. علاوه بر این، IgG1، IgG و IgG2a اختصاصی در سرم ها با ELISA مورد بررسی قرار گرفتند.یافته ها:داده های وسترن بلات نشان دهنده وجود پروتئین تولید شده است که با سرم ایمون سازی شده موش ها ارتباط دارد. تجزیه و تحلیل پرولیفراسیون لنفوسیت نشان داد که یک میکروگرام rCagA باعث افزایش تولید لنفوسیت ها نسبت به گروه کنترل می شود., Helicobacter pylori is recognized as one of the most common causes of human gastric infection, and about half of the world’s population carries this organism. The goal of this study was to determine role of H.pylorilipopolysaccharide (LPS) and rCagA as stimulating host immune responses in the context of a vaccine.Methods:In this experimental study, BALB/c mice were immunized with different formulations three times orally followed by two times intramuscularly (IM) at 14-day intervals. The protective effects of two component vaccines plusCpG Adjutants were assessed before and post-immmunization in separate studies. The gene expression of IL-4, IL-10, IL-12 and IFN- were measured in sera of immunized mice before and post-immunization using RT-PCR test. Moreover, the specific IgG1, total IgG and, IgG2a antibodies in sera were studied by ELISA. Results:Data of westernblotting confirmed the presence of produced protein interacted with immunized mice sera. Analysis of lymphocyte proliferation showed that one microgram rCagA increases lymphocytes proliferation compared to control group. Immunization of mice with H. pylorircagA + LPS +CpG induced a strong local and systemic Th1 immune response.