آنالیز مولکولی ژن CYP21A2 در بیماران هایپرپلازی مادرزادی آدرنال(CAH) باروش تعیین توالی

Abstract

هدف از این مطالعه آنالیز مولکولی ژن CYP21A2 در بیماران CAH باروش تعیین توالی می باشد.این مطالعه یک مطالعه اپیدمیولوژی توصیفی بوده و بر روی افراد منتخب دارای معیبار های ورود به این مطالعه که طی سال های 90-91 به مرکز تشخیص ژنتیک تبریز مراجعه کرده بودند صورت گرفبت.پس از نمونه گیری و استخراج ژنوم، PCR بروی اگزون ها برای شناسایی انواع جهش ها در ژن CYP21A2بر روی هر یک از نمونه ها صورت گرفت. پس از آن محصولات PCR تعیین توالی شدند. جهت آنالیز داده ها، نتایج توالی بدست آمده با نرم افزارهای Blast و MEG_5 با ژن مرجع مقایسه شد و تغییرات بدست آمده با BDGP, Polyphene, SIFT برای پیش بینی تغییرات عملکردی چک شد. شیوع این بیماری در جمعیت مورد بررسی از نوع کلاسبیک دافبم نمبک و ببه میبزان کمتبر بصبورتمردنمایی ساده می باشد.از مجموع 21 فرد مبتلا که در این مطالعه بررسی شدند، 18 نفر دارای جهش در هر دو کرومبوزوم، 2 نفبر دارایجهش فیط در یک کروموزوم و یک نفر نیز فاقد جهش بودند. فراوانترین جهشبها Q318X ( 45 %( و R356W( 28 %( می باشد., Congenital Adrenal Hyperplasia (CAH) is an inherited autosomal recessive enzymatic disorder involving the synthesis of adrenal corticosteroids. 21-Hydroxylase deficiency (21-OHD) is the most common form of the disease which is observed in more than 90% of patients with CAH and the frequency of it is 1/10000 to 1/15000 in populations.A marker of the disease is errors in the CYP21A2 gene with 10 exons. Aims of this study is molecular analysis CYP21A2 gene in CAH patients by sequencing. This research was a descriptive epidemiological study conducted on individuals elected by the inclusion criteria whom were referred to the Genetic Diagnosis Center of Tabriz during 2012 to 2013. After sampling and DNA extraction, PCR for the detection of mutations in the CYP21A2 gene was performed followed by sequencing.For data analysis, the results of sequencing were compared with the reference gene by blast and MEGA-5 software. Obtained changes were compared with NCBI databases also with SIFT, Polyphene and BDGP for predicting functional changes. Prevalence of the disease in this population was in Salt Wasting classic form and fewer in Simple Virilising form. In this research of 21 patients both chromosomes were affected by mutations in 18 patients ,2 patients carried only 1 copy of mutation and in one patient no mutation was detected. The most frequent findings were Q318X (45%) and R356W (28%).