بررسی اثر مرفین بر میزان بیان ژنهای 5--ردوکتاز ، آروماتاز و P53 در سلولهای بنیادی عصبی مغز رت
چکیده
هدف از این مطالعه، بررسی اثر مرفین بر میزان بیان ژنهای 5--ردوکتاز ، آروماتاز و P53 در سلولهای بنیادی عصبی مغز رت می باشد. :عوارض مضر مرفین (100 میکرومولار) بر رشد، کلونی زایی وKi-67 بعنوان مارکر تکثیری با روش‌های MTT و فلوسیتومتری در حضور و عدم حضور نالوکسون (100 میکرومولار) در زمان‌های 24، 48 و 72 ساعت ارزیابی شد. همچنین میزان بیان ژن p53 و ژنهای مرتبط با سنتز هورمون‌های جنسی بنام‌های 5--ردوکتاز و آروماتاز با روش real-time PCR بررسی شد. با توجه به داده‌های به دست آمده کاهش در میزان حیات سلولی مشاهده گردید و همچنین کاهش 5/1 برابری در بیان Ki-67 وکاهش 2 برابری در تشکیل کلون در سلولهای تیمار شده با مرفین در پایان آزمایش مشاهده گردید. نالوکسون باعث حذف اثرات القایی مرفین گردید. همچنین بعداز 48 ساعت تیمار با مرفین ، تغییرات افزایشی تقریبی 5/2 برابری در میزان بیان ژنهای p53، 5--ردوکتاز و آروماتاز مشاهده شد.,
In many studies, an inherently harmful potency of different analgesic agents has been cleared on nervous system. Besides relieving pain, normal functional and integrity of various types of tissues are being affected by chronic use of morphine. Up to now, a lack of comprehensive data exists on mechanistic effect of morphine on CNS with focusing on neural stem cells healthy status and neuro-steroidogenesis. The potent adverse effects of morphine (100 µM) on rat neural stem cells viability, clonogenicity and the proliferation-associated proteins Ki-67 evaluated by MTT assay and flow cytometry in the presence or absence of naloxone (100 µM) over a time course comprised of 24, 48, 72 h. In addition, the expression of p53, and genes related sex hormone synthesis, namely aromatase and 5-alpha reductase was monitored by real-time PCR. According to data, we determined an increase in cell survival with a 1.5-fold decrease in Ki-67 and 2 fold in colony formation rate after treatment with morphine. Naloxone blunted the detrimental effects of morphine. Additionally, we notified a 2.5 fold increase in level of p53, 5- reductase, and aromatase in cells exposed to morphine.