بررسی تولیدآنزیم های بتا لاكتاماز طیف وسیع (ESBL) تیپ SHV, TEM, CTX در باكتری های غیر فرمانتاتیو جدا شده از نمونه های بالینی و بیماران حامل مدفوعی سالم در مركز درمانی و آموزشی امام رضا (ع) تبریز- 1395

Abstract

هدف این مطالعه بررسی میزان حمل مدفوعی باسیل های هوازی غیرفرمانتاتیو تولیدکننده ESBL تیپ TEM ,SHVو CTX بود. همچنین این ESBLs در ایزوله های بالینی سودوموناس آئروژینوزا به روش¬های ژنوتیپی و فنوتیپی بررسی شدند. در مجموع 300 نمونه شامل100 نمونه مدفوع از بیماران سرپایی و100 نمونه مدفوع از افراد بستری در بیمارستان جمع آوری و روی مک کانکی آگار حاوی mg/L 2 سفوتاکسیم کشت شدند و باکتری های نان فرمانتاتیو بعد از 24 ساعت انکوباسیون در °C37 با تست های روتین باکتریولوژیک شناسایی شدند. همچنین 100 ایزوله بالینی نان فرمانتاتیو نیز از مواد پاتولوژیک جمع آوری گردید. حساسیت آنتی بیوتیکی ایزوله ها با روش دیسک دیفیوژن تعیین شد و جهت تعیین باکتری های مولدESBL از تست دیسک ترکیبی استفاده شد. در نهایت ژن هایblaTEM ،blaSHV و blaCTX با روش PCR مورد بررسی قرار گرفتند.6(6%)، 4(4%) و 78(78%) ایزوله به ترتیب از نمونه های مدفوع افراد بستری، سرپایی و بالینی به عنوان باسیل های نان فرمانتاتیو مقاوم به سفوتاکسیم شناسایی شدند. همه ایزوله های بیماران سرپایی و بستری به سفوتاکسیم، تری متوپریم –سولفومتاکسازول، جنتامیسین، کانامیسین و نالیدیکسیک اسید مقاوم بودند در حالی که به پلی میکسینB و مروپنم حساس بودند. ایزوله های بالینی اغلب به آمیکاسین، جنتامیسین، سفپیم و پلی میکسین B حساس بودند.33%(2 از6) باسیل های غیرتخمیرکننده مقاوم به سفوتاکسیم جدا شده از بیماران بستری و 43%(34 از78) ایزوله های بالینی مقاوم به سفوتاکسیم ESBL مثبت بودند. 100%(2 از 2) سویه های مولد ESBL در بیماران بستری، توالی ژن های blaCTX-M و blaSHVرانشان دادندو هیچکدام از باکتری های نان فرمانتاتیو جدا شده از مدفوع بیماران سرپایی مولد ESBL نبودند. 2/35% (12 از 34) سویه های مولد ESBL در ایزوله های بالینی، توالی ژن های blaTEM را نشان دادند., The aim of this study was to investigate the faecal carriage rate of TEM, SHV and CTX type ESBL producing non-fermentative aerobic bacilli (NFAB). Also these ESBLs were inspected among clinical isolates of Pseudomonas aeroginosa (PA) by phenotypic and genotypic methods A total of 300 specimens including 100 stool samples from outpatientss and 100 stool samples from hospitalized patients were collected and cultured on MacConkey agar supplemented with 2 mg/L cefotaxime. Non-fermentative bacilli were identified after 24 hr incubation at 37°C by routine biochemical tests. 100 clinical isolates of NFB also were collected. Antibiotic susceptibility of isolates was determined by disc diffusion method and Combind disc tests were used to select ESBLs producing bacteria. PCR was used to identify TEM, SHV and CTX type ESLs producing isolates. Six (6%), 4 (4%) and 78 (%78) bacteria from stool of inpatients, outpatients and clinical specimens were identified as cefotaxime resistance nonfermentative bacteria. All isolates of inpatients and out patients were resistant to cefotaxime, trimethoprim sulfamethoxazole, gentamicin, kanamycin and amoxicilin-clavulanic acid while Polymyxin B and Meropenem were 100% effective. Clinical isolates were mostly sensitive to amikacin, Gentamicin, cefepim and Polymyxin B. 33%(2 from 6) cefotaxim resistant NFAB from hospitalized patients and 43%(34 from 78) cefotaxim resistant clinical isolates were positive ESBL. PCR analysis showed CTX-M and SHV resistance genes in %100 (2 of 2) of inpatient isolates. None of these genes was observed in outpatient isolates. Amongst clinical isolates %35.2 (12 of 34) were identified to be positive for the blaTEM gene.