تاثیر تجویز تروگزروتین در موش های حامله تغذیه شده با رژیم غذایی پرچرب بر سطح آپلین 13 خون و بیان ژن گیرنده های آن در تخمدان و تغییرات بافتی تخمدان در زاده های ماده

Abstract

در این تحقیق ، تاثیر تروگزروتین در طی دوره بارداری بر میزان آپلین-13، بیان ژن مربوط به گیرنده آن در بافت تخمدان و نیز تغییرات بافتی در تخمدان زاده های مادران تغذیه شده با رژیم غذایی پرچرب بررسی شد.در این مطالعه 40 رت ماده نژاد ویستار با سن سه هفته توسط رژیم غذایینرمال(CD) و رژیم پرچرب (HFD) به مدت 8 هفته قبل از بارداری تغذیه شدند. پس از جفت گیری، حیوانات باردار به 4 زیر گروه شامل گروه کنترل (CD)، گروه کنترل همراه با گاواژ تروگزروتین (CD + Tro)،رژیم پرچرب(HFD) و رژیم پرچرب به همراه گاواژ تروگزروتین ( HFD+Tro) تقسیم شدند. رژیم پرچرب در گروه های مادران تا خاتمه دوره شیردهی ادامه یافت. تروگزروتینبه میزان mg/Kg/day 150 تا انتهای دوره بارداری و به مدت 21 روز و در گروه هایCD + TroوHFD+Tro گاواژ شد. زاده های مربوط به گروه های مختلف پس از اتمام دوره شیر دهی( روز 21) از مادران خود جدا شده وبا رژیم نرمال تغذیه شدند. در روز90 ام بعد از تولد ،حیوانات بیهوش شده و تحت عمل جراحی اواریکتومی قرار گرفتند. یكی از تخمدان ها در دمای 70- درجه سانتی گراد برای مطالعات مولکولی نگهداری شد و تخمدان دیگر نیز برای مطالعات بافت شناسی در محلول بافر فرمالین طبیعی 10 درصد قرار داده شد.سطح سرمی آپلین-13 توسط کیت الایزا اندازه گیری شد.نتایج ما نشان داد که درمان با تروگزروتین در طی دوران بارداری به طور معنی داری موجب کاهش میزان بیان ژن مربوط به گیرنده آپلین-13 در تخمدان زاده های گروه HFD+Tro در مقایسه با گروه HFDگردید (p<0.05). به علاوه استفاده از رژیم پرچرب درمادران سبب كاهش معنی دار درتعداد فولیکول های اولیه،ثانویه و گراف در زاده های گروه HFD نسبت به گروه کنترل گردید(p<0.05). با این وجود، درمان با تروگزروتین در طی دوران بارداری تعداد فولیکول های آترتیک را به طور قابل توجهی در زاده های گروه +Tro HFD نسبت به گروهHFD کاهش داد(p<0.05) .همچنین غلظت سرمی آپلین-13 در زاده های گروه های HFD و HFD+Tro کاهش معنی داری را نسبت به گروه کنترل نشان داد(p<0.05)., In this study, the effect of troxerutin treatment during pregnancy on serum level of apelin-13, gene expression of its receptor in the ovarian tissues, and histological changes of the ovary in the offspring of high fat diet (HFD) fed mothers were investigated. Female Wistar rats (n= 40), three weeks old, received normal diet (CD) or HFD for 8 weeks prior to breeding. After mating, pregnant animals wereassigned to four subgroups including: CD, CD + Tro, HFD, and HFD + Tro. HFD persisted in HFD and HFD+TRO groups to the end of lactation. Troxerutin (150 mg/kg/day) was gavaged during pregnancy. On 21st day all female offspring were weaned and fed normal diet until 12 weeks old. On post natal day (PND) 90 animals were anesthetized and then ovariectomy surgery was performed. One of the ovaries was kept at -70 used for molecular study and the other one was placed in 10% formalin buffer solution for histological assay. Moreover, blood level apelin-13 was assessed by enzyme-linked immunosorbent (ELISA) kit. Our results showed that administration of troxerutin during pregnancy significantly decreased expression of apelin-13 receptor gene in the ovaries of the offspring in HFD+Tro group as compared with HFD group (P<0.05). Moreover, maternal HFD significantly decreased the number of primary, secondary and graafian follicles of HFD offspring as compared with control (p<0.05). However, troxerutin treatment significantly decreased the number of atretic follicles in the offspring of HFD+Tro group as compared with HFD group (p<0.05). Furthermore, serum level of apelin-13 significantly decreased in the HFD and HFD+Tro groups in comparison with control group (p<0.05).