بررسی اثر سینرژیستی عصاره¬ی Curcuma Longa و گلوکوکورتیکوئیدها بر القای آپوپتوز و بیان ژن¬های کاسپاز 3، Bcl-2و Bax در رده¬های سلولی (REH و Nalm-6) لوسمی لنفوئیدی حاد (ALL)

Abstract

هدف از این مطالعه بررسی اثر عصاره¬ی CL برروی رده¬های سلولی لوسمی لنفوبلاستیک حاد Nalm-6 و REH و هم چنین بررسی اثر سینرژیک آن در مجاورت با داروی پردنیزولون بر روی رده¬های سلولی ذکر شده بود.رده¬های سلولی لوسمی لنفوبلاستیک انسانی Nalm-6 و REH و رده¬ی سلولی طبیعی کلیه¬ی گاو MDBK در این تحقیق استفاده شده¬¬اند. سلول¬ها با دز¬های مختلف عصاره¬ی CL و داروی پردنیزولون تیمار شدند. اثرات عصاره¬ی CL و داروی پردنیزولون بر تکثیر سلولی، فعالیت متابولیک و میزان زنده¬مانی سلول¬ها به ترتیب با روش¬های تریپان بلو و MTTبررسی شدند. از فلوسیتومتری برای ارزیابی آپوپتوز استفاده شد. در ادامه برای بررسی مسیر آپوپتوز بیان mRNA ژن¬های Bax و BCL-2 با استفاده از RT-PCR و میزان فعالیت کاسپاز 3 با استفاده از روش رنگ سنجی اندازه¬گیری شد.بر اساس نتایج این مطالعه عصاره¬ی CL موجب مرگ سلول¬های Nalm-6 و REH شده اما پردنیزولون تنها بر روی سلول¬های رده¬ی Nalm-6 اثر سیتوتوکسیک داشت. در ادامه به هنگام مجاورت این دو تنها در سلول¬های Nalm-6 سینرژی مشاهده شد. نتیجه¬ی انجام این تیمارها بر روی سلول¬های طبیعی MDBK زنده ماندن اکثریت آن¬ها بود. عصاره¬ی CL موجب القاء آپوپتوز و افزایش فعالیت کاسپاز 3 و بیان ژن Bax و کاهش بیان ژن Bcl-2 در سلول¬های Nalm-6 شده و در هنگام مجاورت با پردنیزولون این اثرات تشدید شدند. عصاره¬ی CL در سلول¬های REH باعث القاء آپوپتوز شده و بیان ژن Baxو فعالیت کاسپاز 3 را افزایش داد، همچنین موجب کاهش بیان ژن Bcl-2 شد., Curcuma Longa (CL) extract is a natural compound derived from the roots of Curcuma Longa. Prednisolone is a synthetic glucocorticoid and one of the most important pharmaceutical agents used for treatment of acute lymphoblastic leukemia. Our objective was to study the cytotoxic effect of Curcuma Longa extract and the synergistic effect of Curcuma Longa extract in combination with Prednisolone on acute lymphoblastic leukemia Nalm-6 and REH cell lines. The obtained results of this research revealed that CL extract led to the death of Nalm-6 and REH cells while Prednisolone demonstrated cytotoxic effects solely on the Nalm-6 cells. In addition, after combining CL extract and Prednisolone the synergistic effect was observed only on Nalm-6 cells. The outcome of treatment on normal MDBK cells was viability of most of the cells. CL extract induced apoptosis and increased expression of the Bax gene and caspase-3 activity. It also reduced Bcl-2 gene expression in Nalm-6 cells, and the aforementioned effects were amplified in the presence of prednisolone. In REH cells, CL extract induced apoptosis and increased Bax gene expression and caspase-3 activity. It also reduced expression of the Bcl-2 gene. In general, our findings suggest that CL extract has cytotoxic effects on acute lymphoblastic leukemia cells and it also amplifies the cytotoxic effect of prednisolone on Nalm-6 cells.