تاثیر هیپوکسی بر الگوی متیلاسیون پروموتر ژن های مقاومت دارویی در سلول MOLT-4 بر بستر سلول های مزانشیمی مغز استخوان

Abstract

خانواده پروتئین های مقاومت دارویی بعنوان مهمترین پروتئین های دخیل درمقاومتبه درمان در بیماران سرطانی شناخته شده اند. خانواده ژن هایMDRو MRP از مهمترین ژنهای مقاومت دارویی هستند که در ایجاد مقاومت به درمان مظنون شناخته شده اند که در شکست درمان و افزایش مرگ و میر بیماران سرطانی در طی درمان نقش مهمی ایفا می کنند. ژنهای MDR-1 و MRP-1دو جزء مهم از اجزای این خانواده هستند. در لوسمی لنفوبلاستیک حاد نشان داد شده است که افزایش بیان نابجای این ژن ها در سلول¬های لنفوبلاستیک منجربهایجاد مقاومت به درمان دارویی و عدم مهار روند سرطان در این سلول¬ها می شود. در این مطالعه به منظور بررسی تاثیر اپی ژنتیکیهایپوکسی که از خصوصیات فیزیولوژیکی مغز استخوان بودهو در روند سرطان در مغز استخوان نیز تشدید می شود، وضعیت متیلاسیون ژن¬های MDR-1و MRP-1 در رده سلولی سرطانیMOLT-4، تیمار شده باکلرید کبالت به عنوان عامل ایجاد کننده هیپوکسی ، مورد ارزیابی قرار گرفت.مواد و روش ها : پس از هم کشتی سلول های MOLT4بر بستر سلول های مزانشیمی همراه با کلرید کبالت، DNA طبق پرتوکل استخراج شد و با سدیم متا بی سولفیت تیمار شد و سرانجام به منظور بررسی تغییر در وضعیت متیلاسیون ژن¬هایMDR-1 و MRP-1، تست MSP (Methylation Specific PCR) در دستور کار قرار گرفت.یافته ها : تست MSP نشان می¬دهد که ژن MDR1در سلول های MOLT4در وضعیت غیر متیله قرار داشته و در شرایط همکشتی با سلول های مزانشیمی به همراه هیپوکسی با گذشت زمان دچار متیلاسیون میشود. و ژن MRP1دارای متیلاسیون نسبی در ناحیه پروموتوری خود می باشد. و شرایط همکشتی با سلول های مزانشیمی و هیپوکسی تغییری در الگوی متیلاسیون آن به وجود نمی آورد., After the co-culture MOLT4 cells in the context of mesenchymal cells with cobalt chloride, DNA was extracted according to the protocol and was treated with sodium metabisulfite, and finally to evaluate changes in methylation status of genes MDR-1 and MRP-1, MSP test (Methylation Specific PCR) was on the agenda.findings:MSP test showed that MDR1 gene in cells MOLT4 placed on non-methylated status of and in co-culture with mesenchymal cells with hypoxia over time methylation process beginsmethylation. And the MRP1 gene in hypoxic conditions and in co-culture with mesenchyymal cell Does not indicate a change in the pattern of methylation.