تاثیر نانوپارتیکل کیتازونی حاوی siRNA سرکوب کننده بیان HMGA2 و داروی Doxorubicin بر رشد، متاستاز و مهاجرت رده سلولی متاستاتیک سرطان پستان (MDA-MB-231)

Abstract

آدنوکارسینوم سینه نوعی از سرطان سینه است که از بافت غده ای منشا می گیرد. این سرطان اغلب در زنان ایجاد می شود. مطالعات جهانی نشان می دهد که ابتلا به این سرطان در حال افزایش می باشد بطوریکه سالیانه بیش از 502000 زن به علت ابتلا به این سرطان جان خود را از دست می دهند. RNA کوچک مداخله گر (siRNA) مولکول RNA دو رشته ای است که قادر است به RNA های هدف اتصال پیدا کند و بیان آن را مهار کند. مواد و روش ها: سلول های MDA-MB-231 با نانو پارتیکل حاوی siRNA سرکوب کننده بیان HMGA2 و داروی Doxorubicin در محیط کشت RPMI 1640 به همراه 10% FBS در شرایط استریل کشت داده شدند. برای بررسی بیان E-cadherin، MMP9 و Vimentin از روش QRT-PCR استفاده می شود. به این صورت که RNA کل سلولها (Total RNA) استخراج شده و سپس روش Quantitative RT PCR انجام گرفت. در این روش کمی، میزان نسخه های mRNA E-cadherin، MMP9 و Vimentin بر اساس میزان فلورسانت تولید شده اندازه گیری گردید. برای بررسی اثرات نانوپارتیکل حاوی siRNA سرکوب کننده بیان HMGA2 و داروی Doxorubicin بر روی تکثیر رده سلولی سرطان پستان از تست MTT استفاده شد. همچنین برای بررسی اثرات آپوپتوزیس از کیت annexin-V استفاده شد. برای تست مهاجرت(Migration assay) از روش Wound healing assay استفاده گردید. یافته ها : با توجه به نتایج بدست آمده مشخص گردید که بیان ژن های Vimentin، MMP9 و E-cadherin تحت تاثیر مهار بیان ژن HMGA2، تغییر پیدا می کند. بدینگونه که مهار HMGA2 باعث مهار Vimentin و MMP9 و باعث افزایش بیان E-cadherin شد. , Breast Adenocarcinoma is a type of breast cancer that originates in glandular tissue. This cancer occurs more often in women. International studies show that the incidence of this cancer is on the rise So that women suffering from cancer each year more than 502,000 lose their lives. Small interfering RNA (siRNA) is a double-stranded RNA molecule that can bind to target RNA and inhibit its expression.Materials and Methods: MDA-MB-231 cells are cultured with Nano-particles containing HMGA2 siRNA and Doxorubicin in RPMI 1640 medium with 10% FBS. For the expression of E-cadherin, MMP 9 and Vimentin QRT-PCR method is used. This means that the total cell RNA (Total RNA) extracted and Quantitative RT PCR method is done.In this method, expression of E-cadherin, MMP 9 and Vimentin mRNA level was measured based on the amount of fluorescence produced. For investigate the effects of complete nanoparticles, on the proliferation of breast cancer cell lines we have used the MTT test. Also annexin-V kit was used to investigate apoptosis. And for testing the Migration (Migration assay) Wound healing assay method was used.Results: The results of this studies shows the directly relations between the expression of HMGA2, Vimentin and MMP-9 genes and of course inversely related the expression of E-cadherin gene mentioned became clear.