بررسی مکانیسم احتمالی اثر LPG3 لیشمانیا ماژور در بیان ژنهای سایتوکاین های IFN- وTNF- از سلول های كشنده ی طبیعی (NK) خالص شده انسانی از طریق تحریک TLR2

Abstract

لیشمانیوز یکی از شایع ترین بیماری های عفونی منتقل شده توسط جنس داخل سلولی اجباری لیشمانیا است. تا به حال هیچ استراتژی واکسیناسیون کارآمد برای لیشمانیوز در نتیجه ادجوانت جدید و افزایش پاسخهای ایمنی محافظ شده وجود ندارد. لیپو فسفو گلیکان 3 نقش مهمی در سنتز لیپوفسفوگلیکان داشته، به عنوان یک عامل مهم برای بیماری زایی انگل به شمار می آید. در این مطالعه، توانایی لیپو فسفو گلیکان 3 نوترکیب و قطعات آن را برای فعال سازی سلول های کشنده طبیعی و ترشح سیتوکاین مورد بررسی قرار گرفت. مواد و روش ها: در این مطالعه با استفاده از نانو ذرات مغناطیسی سلولهای کشنده طبیعی جدا شد. در مرحله بعد با لیپو فسفو گلیکان 3 و قطعات آن، در حضورو عدم حضور آنتی بادی های مهاری پروتئین شبه تول 2 تیمار شد. پس از 72 ساعت مایع رویی سلول ها جدا شد و میزان ترشح سایتوکاین ها و بیان ژن بررسی گردید.یافته ها: نتایج ما نشان داد که لیپو فسفو گلیکان 3 نوترکیب و و قطعه N-ترمینال آن باعث افزایش معنی دار ترشح اینترفرون گاما، فاکتور نکروز دهنده تومور الفا، توسط سلول های کشنده طبیعی می گردد. همچنین نتایج نشان داد، که فعال شدن سلول های کشنده طبیعی مستقل از مسیر سیگنالینگ گیرنده شبه تول 2 می باشد.بحث: می بایستی تحقیقات بیشتری در زمینه ایمنی زایی لیپو فسفو گلیکان 3 و به طور خاص، قطعه N- ترمینال آن و مسیر سیگنالینگ آن به منظور تولید یک واکسن موثر بر علیه لیشمانیوز صورت گیرد., The development and implementation of an effective vaccine is a main goal for controlling and eliminating of Leishmania. Strong adjuvant activity that stimulates an innate and adaptive immunity is essential for effective vaccine development. Lipophosphoglycan 3 (LPG3), the Leishmania homologous with GRP94 (glucose regulated protein 94), a member of HSP90 family, is involved in assembly of LPG as the most abundant macromolecule on the surface of Leishmania promastigotes.Material and Method: In the present study, we isolated and purified NK cells from healthy individual using MACS technology. Purified NK cells were co-incubated with different concentrations of recombinant LPG3, CT and NT fragments. Finally, the production of IFN- and TNF- by NK cells were measured by ELISA.Results: Our results showed that recombinant LPG3 but not its fragments (CT and NT), can statistically meaning fully induce NK cells to produce TNF- (p<0.002). On the other hand, recombinant LPG3, CT and NT fragments have a stimulatory effect on IFN- production by NK cells (p<0.001).