بررسی ارتباط بین بیان TLR9 در سلول های تک هسته ای خون محیطی با میزان ترشح IFN- و غلظت سرمی آنتی بادی های ضد هسته ای در بیماران مبتلا به لوپوس اریتماتوز سیستمیک

Abstract

بررسی ارتباط بیان TLR9 در سلولهای تك هسته ای خون محیطی با میزان ترشح IFN- و غلظت سرمی آنتی بادی های ضد هسته ای در بیماران مبتلا به لوپوس اریتماتوز سیستمیکدکتر زهره بابالو، دکتر عیسی صالحی ، سحر مرتضی قلیزمینه: بیماری لوپوس اریتروماتوز سیستمیک بیماری خود ایمن سیستمیكی با ناهنجاری های متعدد ایمونولوژیک است كه به التهاب و آسیب اندام های مختلف منجر می شود. پاتوژنز بیماری هنوز به طور قطع شناسایی نشده و در نتیجه درمان كامل آن ممكن نیست. مطالعات اخیر نشان داده اند که برخی ناهنجاری های ایمنی ذاتی ممکن است در SLE دخیل باشند. از آنجائیکه مدارک مهمی از درگیری TLR ها به ویژه TLR9 و IFN- در پاتوژنز بیماری حمایت می کنند، این مطالعه به بررسی بیشتر نقش این مولکول ها پرداخته است.روش بررسی: در این مطالعه 35 بیمار مبتلا به لوپوس و 38 فرد سالم بررسی شدند. میزان بیان TLR9 درسلول های تک هسته ای خون محیطی توسط فلوسیتومتری وReal-Time PCR بررسی شد. سلول های تک هسته ای خون محیطی به مدت 24 ساعت کشت داده شدند و سپس میزان ترشح IFN- در هر دو گروه در حالت با و بدون تحریک با CpG2216 به روش ELISA اندازه گیری شد. تیتر آنتی بادی های ضد هسته ای نیز با استفاده از روش ایمونوفلورسنس غیر مستقیم اندازه گیری شد. یافته ها: بر اساس نتایج این مطالعه میزان بیان TLR9 در سطح mRNA در سلولهای تك هسته ای خون محیطی گروه بیماران به طور معنی دار (p<0.05) بیشتر از گروه کنترل بود. بیان داخل سلولی TLR9 در سلول های تک هسته ای خون محیطی در گروه بیماران نسبت به گروه کنترل افزایش معنی دار(p<0.05) داشت. تیتر آنتی بادی های ضد هسته ای نیز در گروه بیمار بیشتر از گروه کنترل بود(p=0.001). میزان ترشح IFN- در حالت تحریک شده با CpG2216 در گروه بیماران به طور معنی دار (p<0.05) کمتر از گروه کنترل بود., Systemic lupus erythematosus (SLE) is a systemic autoimmune disease with various immunological abnormalities that result in inflammation and damage to a range of organ systems. The exact etiology of disease is still unclear and there is no cure for SLE. Recent studies has shown that some abnormality of innate system may be involved in SLE. Since significant evidences support the involvement of TLRs, TLR9 in particular, and IFN- in pathogenesis of SLE, this study was done to more evaluate role of this molecules.Methods: 35 patients with systemic lupus erythematosus and 38 healthy subjects were studied. TLR9 expression quantity in peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) was evaluated by flowcytometry and Real-time PCR. PBMCs were cultured for 24 hours. Secretion of IFN- was measured by ELISA, in stimulated with CpG2216 and unstimulated conditions. Titers of Antinuclear antibodies (ANAs) was measured by Indirect ImmunoFluorescence (IIF).Results: The expression levels of TLR9 mRNA on PBMCs from patients with SLE was significantly (p<0.05) higher than healthy controls. The intracellular expression of TLR9 on PBMCs was significantly (p<0.05) higher in patients. Titer of antinuclear antibodies was significantly (p=0.001) higher in patients. CpG induced IFN- production was significantly (p<0.05) reduced in PBMCs from SLE patients as compared with PBMCs from healthy controls.