بررسی تفاوت بیان اجزای سیستم ویرایش micro RNA (آنزیم های Dicerو Drosha و( DGCR8 در سرطان معده و بافت نرمال

Abstract

به تازگی microRNA ها به عنوان یک عامل اصلی در بیولوژی سلولی و سرطان ها مطرح شده اند. DROSHA و DICER به عنوان 2 آنزیم عمده درگیر در بلوغ microRNA ها مطرح اند و نقش برجسته ای را در تنظیم بیان این دسته از مولکول ها بر عهده دارد. پروتئین DGCR8 به عنوان یک پروتئین کمک کننده به آنزیم DROSHA در کمپلکس بلوغ microRNA است. از طرفی سرطان معده به عنوان سومین سرطان شایع در جهان مطرح است. که علی رقم پیشرفت های چشمگیری که در دهه های اخیر در تشخیص زودرس آن به عمل آمده همچنان دارای آمار مرگ و میر بالایی است و میزان مرگ ناشی از آن طی 50 سال گذشته تغییری پیدا نکرده است. در این مطالعه ما اقدام به بررسی میزان بیان 3 پروتئین عمده درگیر در بلوغ microRNAها یعنی DROSHA , DICER و DGCR8 نموده ایم.مواد و روش ها: ابتدا محتوای RNA از بافت های سرطانی و مارژینال 50 فرد مبتلا به سرطان معده استخراج گردید. سپس cDna از RNA سنتز گردید. سپس بین ژن ها با استفاده از روش Real time RT-PCR و با استفاده از رنگ SYBER Green مورد بررسی و ارزیابی قرار گرفت.نتایج: طبق بررسی انجام شده در این مطالعه بیان هرسه ژن مورد بررسی در بافت تومورال در مقایسه با بافت نرمال دارای افزایش بیان بوده به طوری که p value مربوط به 3 ژن به ترتیب برای ژن DROSHA P =0.038)) , برای ژن DICER (P=0.001) و برای ژن DGCR8 (P=0.001) می باشد. هرچند که این افزایش بیان رابطه معنی ذاری با ارتباطات هیستولوژیکی بیماران نداشت., MicroRNAs (miRNAs) have recently been shown to play fundamental roles in diverse cellular processes and linked to variety of cancers. Dicer and Drosha are two major enzymes in the miRNA maturation process. DGCR8is the assistant of Drosha in the microprocessor complex. Gastric cancer is the third most common cancer in the world, the mortality has remained the same for the 50 years despite major advance in early prognoses of this cancer. This study, we evaluated the mRNA expression profilesof major miRNA processing machinery Drosha, Dicer, and DGCR8 in human gastric cancer tissue and its margin.Material and method: First total RNA content was extracted from cancer tissue and corresponding marginal tissue from 50 patients with gastric cancer. Then, first-strand cDNA was synthesized from the RNA of tissues. Afterward, Quantitative analysis was performed by real-time RT-PCR using the PowerSYBER Green PCR Master Mix. Results: Expression levels of Drosha In caner tissue cells were higher than the controls, also, Drosha’s expression level in cancer tissue was higher. The DGCR8 expression levels significantly higher than the control samples whereas here is no association with theire genes expression levels and histological information