تاثیر هم کشتی سلولهای رده U266به همراه سلولهای مزانشیمی بر میزان بیان مارکر CD54

Abstract

هدف از این مطالعه ارزیابی اثراتMSCs بر تکثیر، فعالیت مسیر پیام رسانی NF-B و بیان مارکر CD54می باشد. کارسلولهای U266 درC.M مربوط به UCB-MSCs و در همکشتی مستقیم با آنها کشت داده شدند. میزان تکثیر سلولی بوسیله آزمایشMTT بررسی شد. علاوه بر این برای بررسی بیان مارکر سطحیCD54 از فلوسایتومتری استفاده شد و برای بررسی ژنهای IL-8، IL-6، CCL2، CCL4، PECAM ، JUNB، CD44 و CXCL1 از تکنیک RT-PCR کمک گرفته شد. برای بررسی فعالیت مسیر NF-B پروتئین p65 بوسیله وسترن بلات مورد ارزیابی قرار گرفت. مطالعه ما ثابت کرد کهUCB-MSC تکثیر سلولهای U266 و بیان CD54، IL-8، IL-6، CCL4 و CXCL1 را افزایش می دهد. از طرفی هم داده های حاصل از وسترن بلات نشان از افزایش شکل فسفریله پروتئین p65 داشتند. در تمامی موارد ما اثر قابل توجهی از C.M مشاهده نشد., The aim of this study was the MSCs effect on proliferation, NF-B signaling pathway activity, and expression of CD54 analyzing.U266 cells in MSCs derived C.M and with MSCs were cultured. The proliferation rate was analyzed by MTT assay. Furthermore, expression of CD54, IL-8, IL-6, CCL2, CCL4, PECAM, JUNB, CD44, and CXCL1 were analyzed by Real time-PCR technique. For the measurement of NF-B signaling pathway activity, p65 protein was assessed by western blotting. Our study confirmed that, UCB-MSCs support U266 cells proliferation and increase CD54, IL-8, IL-6, CCL4, and CXCL1 expression. On the other hand, data from western blot show a significant enhancement in level of p65 protein. In all of series we did not observe any significant change by C.M.