ارزیابی آنژیوژنز (رگ زایی) در بافت های تخمدان پیوندی _منجمد شده بعد از انجماد شیشه ای به روش Direct Cover

Abstract

تحقیق اخیر ،اثر انجماد شیشه ای به روش مستقیم (DCV) را بر روی مورفولوژی بافت تخمدانی اتوگرافت و بیان فاکتورهای آنژیوژنیک در پیوند های بافت تخمدانی انجمادی بررسی می کند.تخمدانهای موش6-8 هفته ای مونثBalb/cبعدازانجام بیهوشی خارج شدند . تخمدان های سمت راست بلافاصله بعد از شستشو در -MEMدوباره به همان موش پیوندزده شدوتخمدان های سمت چپ باروش انجمادی پوشش مستقیم بوسیله کرایو پروتکتانت ها(DCV2وDCV3)منجمدشدند،سپس بافت های تخمدانی منجمدوتازه به صورت زیرجلدی به همان موشهابه شکل اتوگرافت پیوندشدند،بعدازیک هفته موشهاقربانی شدندوبافت های تخمدانی توسط میکروسکوپ نوری و هیستولوژی برای مورفولوژی موردارزیابی قرارگرفتند. بیان مارکرهای اندوتلیال و پری سیت هاvWFو -SMA بوسیله ایمنوهیستوشیمی کنترل شد. سطح رونویسی فاکتورهای آنژیوژنیک از قبیل فاکتور رشد اندوتلیال عروقی(VEGF) و آنژِیوپویتین-2(Ang-2) بوسیله Real_time PCR مورد ارزیابی قرار گرفت.دربافت های تخمدانی انجمادی-پیوندی، بشترین تغییرات مورفولوژیکی از قبیل چروکیدگی اووسیت،انقباض سیتوپلاسم وواکوئلهای سیتوپلاسمی متعددرا مشاهده کردیم. مارکرهای -SMA و vWFدرDCV2نسبتبه DCV3بیشتر آشکاربود(p<0.05) و بیان ژنهای VEGF وAng-2 درDCV2 بیشتر بود(p<0.05).