مقایسه زیست پذیری و بیان CD271 در سطح سلولهای بنیادی مزانشیمی بافت چربی و پرده های جنینی (پرده آمنیون)

Abstract

سلول‌های بنیادی مزانشیمی مورد مناسبی برای درمان بسیاری از بیماریها میباشند. پرده آمنیون بعنوان یك منبع ارزان قیمت برای سلول های بنیادی مزانشیمی در سلول درمانی مورد توجه قرار گرفته است. سلول های بنیادی مزانشیمی مشتق شده از بافت چربی نیز منبع مناسبی برای سلول درمانی می باشد. اختلاف نظر هایی در مورد بیان CD271 بر روی سلول های بنیادی مزانشیمی بافت های مختلف وجود دارد. ما در این مطالعه میزان بیان CD271 را بر روی سطح سلول های بنیادی مزانشیی بافت چربی و پرده آمنیون مورد مقایسه قرار داده ایم.مواد و روش‌ها: نمونه‌های بافت چربی از بیمارانی كه تحت عمل جراحی بودند و نمونه‌های پرده آمنیون از افرادی كه تحت عمل سزارین بودند در شرایط استریل تهیه شد. بعد از مراحل جداسازی و کشت سلول های بنیادی مزانشیمی، قدرت تکثیر و قابلیت زیست پذیری سلول‌ها با استفاده از تست MTT و DT و بیان مارکرهای سطحی اختصاصی سلول‌های بنیادی مزانشیمی و بیان CD271 با استفاده از فلوسایتومتری مورد ارزیابی قرار گرفت.نتایج: نتایج حاصل از تست MTT و DT نشان دادند که قدرت تکثیر و قابلیت زیست پذیری در سلول‌های بنیادی مزانشیمی پرده آمنیون بطور معناداری بیشتر از بافت چربی است. میزان بیان كم CD45، CD14 نشان دهنده عدم جود سلول های بنیادی خونی در بافت چربی و آمنیون می باشد. هر دو نمونه درصد بالایی از CD44، CD105 را بیان كردند. نتایج ما نشان داد كه سلول های بنیادی مزانشیمی بافت چربی و آمنیون CD271 را ری سطح خود بیان نمی كنند, Mesenchymal stem cells (MSCs) are the ideal candidate for treatment of diseases. Amniotic membranes as an inexpensive source of MSCs (AM-MSC) without any donor site morbidity in cell therapy. Adipose tissue derived stem cells (ASCs) are suitable cells for cell therapy as well. There is discrepancy in expression of CD271 among MSCs from different sources. In this study, we compared the characteristics of AM-MSC and ADSCs and expression CD271. Materials and Methods: Adult adipose tissue samples were obtained from the patients that undergoing the elective surgical procedure and samples of amniotic membrane were collected immediately after caesarean section. After isolation and expansion of MSCs, the proliferation rate and viability of cells were evaluated by calculating DT and MTT assay. Expression of mesenchymal specific surface antigens of MSCs and CD271 were evaluated by flow cytometry for both types of cells. Results: DT and MTT assay results revealed that the growth rate and viability of the MSCs from the amniotic membrane was significantly higher than the ADSCs. The low expression of CD14 and CD45 indicated that AM-MSC and ASCs are non hematopoietic cells and both of them expressed high percentages of CD44, CD105. Our results showed that AM-MSC and ASCs express no CD271 on surface of MSCs