تاثیر والزارتان بر بیان کلوتو، استرس اکسیداتیو و طول تلومر در نفروتوکسیسیتی سیکلوسپورین در موشهای صحرایی نر

Abstract

نفروتوکسیسیتی (سمیت کلیوی) داروی سرکوب کننده سیستم ایمنی، سیکلوسپورین ، می تواند به عنوان یکی از مشکلات مهم در پروسه درمانی پیوند، مطرح ‌باشد. نفروتوکسیسیتی CsA به صورت مولتی فاکتوریال می باشد اما اکسیداتیو استرس نقشی مهم در این پروسه ایفا می کند. مشخص شده است که والزارتان دارای اثر حفاظتی از کلیه نیز میباشد، ولی مکانیسم دقیق حفاظتی Val از کلیه، مستقل از تأثیر آن در کاهش فشار خون، هنوز به طور کامل مشخص نشده است. هدف از این مطالعه ارزیابی اثر Val بر تسکین نفروتوکسیسیتی CsA، از طریق افزایش احتمالی بیان کلیوی کلوتو و کاهش احتمالی استرس اکسیداتیو بود. همچنین شاخص فعالیت تلومراز و طول تلومر بافت کلیوی، به عنوان فاکتور نوین ارزیابی عملکرد کلیه بررسی شدند.روش کار و مواد: سی و دو (32) موش صحرایی نر بر اساس تجویز CsA و/یا Val در چهار گروه هشت تایی (کنترل، CsA، CsA+Val و Val) قرار گرفتند. مدت تجویز‌ها به مدت 6 هفته بود. مقدار بیان کلیوی ژن Kl با روش real-time PCR و وسترن بلات؛ مقدارسرمی 8-OHdG و Kl با روش ELISA ، مقدار سرمی MDA به روش اسپکتروفوتومتری، میزان شاخص فعالیت تلومراز و نیز طول تلومر بافت کلیوی به ترتیب با روشهای PCR-ELISA و ساترن بلات انجام شدند. یافته ها: میزان بیان کلیوی و مقدار سرمی Kl در گروه CsA به طور معنیداری (p<0.05) کمتر از گروه Val و کنترل بود. مقدار سرمی فاکتورهای استرس اکسیداتیو MDA و 8-OHdG در گروه CsA به طور معنیداری (p<0.05) بیشتر از بقیه گروههای مورد مطالعه بود. طول تلومر بافت کلیه در گروه CsA کمتر از گروههای کنترل و Val بود (p<0.05). تغییر معنیداری در شاخص فعالیت تلومراز بافت کلیه، میان گروههای مورد مطالعه مشاهده نشد (p>0.05). , Nephrotoxicity of the immunosuppressive drug, CsA , can be a major problem in transplant medicine. CsA-induced nephrotoxicity is multifactorial but oxidative stress has an important role in this process. It has been shown that Val has also renoprotective effects, but the molecular mechanism responsible for the Val renal protection, independent from its blood pressure lowering effect, is largely unknown. The aim of the present study was the evaluation of Val effect on alleviation of CsA-induced nephrotoxicity via probable renal Kl upregulation and decreasing oxidative stress. We also aimed to evaluate renal telomerase activity and telomere length as a novel marker of kidney function. Methods: Thirty two (32) Sprague-Dawley rats were divided into four groups (eight per each) based on CsA and/or Val administering (Control, CsA, CsA+Val, and Val). The administration period was six weeks. Renal Kl expression was evaluated by real-time PCR and western blotting. Serum levels of Kl and 8-OHdG were measured by ELISA . MDA levels were measured by spectrophotometrically. Renal telomerase activity and telomere length were measured by PCR-ELISA and southern blotting, respectively. Results: Renal expression and serum levels of Kl in CsA group were significantly (p<0.05) lower than in control and Val groups. The serum levels of oxidative stress markers, MDA and 8-OHdG in CsA group were significantly (p<0.05) lower than in the other study groups. Renal telomere length in CsA group was significantly lower than in control and Val groups (p<0.05). There was no significant difference in renal telomerase activity between the study groups (p>0.05).