القاء سلولهای اپیصتلیوم سطحی تخمدان زنان بالای 35 سال به فولیکولهای اولیه بصورت Invitro

Abstract

Background: Recent studies on mammals have shown that the ovarian follicles might have a different origin. Stem cells of ovarian surface epithelium have the potential to differentiate into oocytes and granulosa cells.The present Study designed for study of OSE culture and differentiation into follicular cells and oocyte, effects of Estrogen and anti steroid on folliculogenesis and study of GDF9 and BMP15 gene expressions in cultured cells. Materials and Methods: OSE cells were obtained from 20 women. The harvested cells cultured in standard condition in 4 groups. Morphology and morphometeryof cultured cells were studied at 1-, 5-, 9-, 15- and 21th day of culture. Furthermore, on day 21, GDF9 and BMP15 (mRNA) expressions were evaluated for screening of developmental stage of cultured OSE cells. Results: The results showed that the OSE stem cells were able to differentiate into oocyte-like cells and follicular-like structures under influence of estrogen. In addition, GDF9 and BMP15 genes, that are oocyte specific markers, were expressed in primary follicles., مطالعه حاضر جهت کشت سلولهای اپیصتلیوم سطحی تخمدان، تمایز آنها به فولیکولهای بدوی و تخمک ، تاثیر استرادیول و آنتی استروئید در فولیکولوژنزیس و بررسی بیان mRNA ژنهای GDF9 و BMP15 در زنان بالای 35 سال طراحی شده است.مواد و روشها: در این روش از 20 نفر از زنانی که تحت عمل جراحی اووارکتومی قرار گرفته بودند نمونه برداری شد. نمونه‌صهای جمع‌صآوری شده تحت شرایط استاندارد در 4 گروه کشت داده شده و در روزهای 1، 5، 9، 15 و 21 زیر میکروسکوپ Invert مورد مطالعه مرفولوژیک و مرفومتریک قرار گرفتند. در روز پایانی (روز 21)، بیان mRNA ژنهایGDF9 و BMP15 نیز بررسی گردید.نتایج: نتایج نشان داد که سلولهای بنیادی موجود در اپیصتلیوم سطحی تخمدان تحت تاثیر استرادیول به سلولهای شبه‌صاووسیت و شبه‌صگرانولوزایی تمایز میصیابند. در روزهای پایانی، این سلولها از نظر مرفولوژی شبیه سلولهای فولیکولی و تخمک بودند. در آنالیز مولکولی، ژنهای GDF9 و BMP15 که از مارکرهای اختصاصی تخمک میصباشند در فولیکولهای اولیه بیان شده بودند.