بررسی فیلوژنی و آنالیز ژنوتایپی مرحلة لاروی ایزوله‌صهای انسانی و دامی اکینوکوکوس گرانولوزوس با استفاده از ژن nad1 در تبریز

Abstract

هیداتیدوزیس یکی از بیماری های زئونوز است که توسط مرحله لاروی انگل اکینوکوکوس گرانولوزوس ایجاد می گردد که از نظر پزشکی، دامپزشکی و اقتصادی در بسیاری از کشورها دارای اهمیت می باشد. با استفاده از روشهای مولکولی تاکنون 10سویه (G1-G10) از انگل اکینوکوکوس گرانولوزوس شناسایی شده است. از آنجایی که نتایج مربوط به ژنوتایپ ها می تواند در مطالعاتی مانند کنترل، اپیدمیولوژی، طراحی واکسن و حساسیت دارویی بکار رود بنابراین این مطالعه به منظور بررسی فیلوژنی وآنالیز ژنوتایپی مرحله لاروی ایزوله های انسانی ودامی اکینوکوکوس گرانولوزوس با استفاده از ژنNad1 درتبریزانجام گرفت. مواد و روش کار: در این مطالعه 45 نمونه کیست هیداتیک شامل 10نمونه از بیمارستان امام رضای(ع) تبریز، 19 نمونه گوسفندی و16 نمونه گاوی از کشتار گاهای تبریز جمع آوری شدند. DNAاز پروتواسکولکس نمونه های انسانی و گوسفندی ولایه زایای نمونه های گاوی استخراج شدند. و بعد ازواکنشPCR والکتروفورز، نمونه ها تعیین توالی شدند سپس با استفاده از نرم افزار های مربوطه آنالیزژنوتایپی و فیلوژنی انجام گرفت.یافته ها: بعد از بررسی ژنوتایپی، دو ژنوتایپ G1 (استرین گوسفندی )G3 (استرین بوفالو) به ازایزوله های انسانی وحیوانی دست آمد.از 10 نمونه انسانی 7 ژنوتایپ G1 و 3 ژنوتایپ G3گزارش شد. از 16 نمونه گاوی 16 ژنوتایپ G1 گزارش گردید. از 19 نمونه گوسفندی، 18ژنوتایپG1 و 1 ژنوتایپ G3بدست آمد., Hydatidosis is one of most important zoonotic parasitic disease caused by larval stage of Echinococcus granulosus.Its great medical,veterinary,and economic importance in many countries .by usingmolecular methods ,10 genotypes (G1-G10) of Echinococcus granulosus species have been identified.Since the genotype study can be effective on control, epidemiology, vaccine design, drug allergy, thus this study was conducted in order to phylogeny and genotyping analysis of Echinococcus granulosus isolates from human and herbivores using Nad1 gene in Tabriz.Materials and methods:In this study, 45hydatid cyst samples, including 10 human samples from Imam Reza hospital of Tabriz,19 sheep samples and 16 bovine samples from the slaughterhouse of Tabriz were collected . DNA was extracted from protoscoleces of human, sheep and germinal layer of bovine samples. After PCR and Electrophoresis, samples were sequenced and then was performed Genotypic and phylogeny analysis with the appropriate software.After genotyping ,genotype G1 (sheep strain) and G3 (Buffalo strain) isolated from animal and human samples. Of 10 human samples ;7 samples G1 genotype, 3 samples G3 genotype were reported. All 16 bovine samples were G1 genotype . Out of 19 sheep samples; 18 samples G1 genotype, 1 samples G3 genotype were reported.