آلودگی گوشت گاو ، گوسفند و مرغ به انگل توکسوپلاسما گوندی و تعیین ژنوتایپ ایزوله های جدا شده به روش مولکولی PCR-RFLPدر شهرستان تبریز سال 93-92

Abstract

توکسوپلاسما گوندی(Toxoplasmagondii) انگل داخل سلول اجباری است که انسان ها را از راههای گوناگون نظیر تماس با خاک آلوده به اووسیست، انتقال خون، و یا گوشت خام و نیم پز آلوده به کیست نسجی انگل آلوده می کند. هدف از مطالعه حاضر بررسی شیوع و تعیین ژنوتایپ انگل توکسوپلاسما گوندی در نمونه های جدا شده از گوشت در آذربایجان شرقی، از شمال غربی ایران.روش ها:در این مطالعه 150 نمونه گوشت، شامل گوشت (گاو،گوسفند و مرغ) از قصابی ها در مناطق مختلف شهر جمع آوری گردید. جهت شناسایی مولکولی انگل توکسوپلاسما از ژن B1 استفاده گردید. سپس با استفاده از آنتی ژن سطحی 2(SAG2) و روش PCR-RFLP با آنزیم های SAU3AIو HhaI نمونه ها تعیین ژنوتایپ شدند. در آخر سه نمونه مثبت از هر کدام از نمونه های میزبان جهت سکانس ژنی و آنالیز فیلوژنیکی انتخاب گردیدند.یافته ها:در این مطالعه به طور کلی 26(33/17%) نمونه ها از نظر توکسوپلاسما گوندی مثبت بود. که شامل 4(8%) از مرغ، 8(16%) از گاو و 14(28%) از گوسفند بود. بر اساس روش PCR-RFLP و همچنین نتایج حاصل از سکانس و آنالیز فیلوژنتیکی تمام نمونه ها ژنوتایپ I را نشان دادند., Toxoplasma gondii, the obligate, intracellular parasite afflicts human in diverse ways such as ingestion of tissue cysts in undercooked meat. The aim of this study was to assess prevalence and genotyping of T.gondiiisolated from meat samples being consumed in East Azerbaijan, Northwest of Iran.Methods: A total of 150 samples, including chicken, beef and lamb meat were collected from retailers in different regions. Molecular detection was done by amplifying B1 gene and T. gondiisurface antigen 2 (SAG2) loci. For genotyping of T. gondii, restriction fragment length polymorphism (RFLP) was performed using Sau3AI and HhaI restriction enzymes. Finally three positive isolates from each host were sequenced to evaluate and phylogenetic analysis.Results: Overall 26 (17.33%) samples were positive for T. gondiiincluding 4 (8%)isolates from chicken, 8 (16%) isolates from cattle and 14 (28%) isolates from sheep. According to the RFLP patterns, sequencing and phylogenetic results, all of the samples were identified as genotype I