بررسی آلودگی به لیشمانیوز احشایی با استفاده از روشهای پارازیتولوژیکی، سرولوژیکی و مولکولی در گربه های منطقه آذرشهر در استان آذربایجانشرقی 92-1391

Abstract

Introduction: Visceral leishmaniasis is a parasitic infections and zoonotic disease in the countries of Mediterranean basin and Middle East, including Iran. The causative agent of visceral leishmania in iran is leishmania infantum and dogs and canines are main reservoirs. Infections of leishmania infantum in feline have been proved. The main objective of this investigation was to screen leishmania infection in feline and possible role in transmission of the disease to human by parasitology, serology and molecular methods in azarshahr District, East Azerbaijan province in 2012-2013. Materials and Methods: Totally 65 cats have been trapped alive from villages of Azarshahr County and their serum samples subjected to DAT for leishmania antibodies. Giemsa stained impression smears have been prepared for parasitological examination of spleen and liver tissue. Also liver and spleen samples of the cats have been cultured in NNN medium and also used for PCR. Results: Amongst them 15 (23.07%) seropositive, 13 (20%) had lower titers than positive and 37 (56.92%) feline were seronegative. The smears were prepared from spleen and liver all animals examined microscopically and did not show any amastigotes. Parts of the spleens and livers of feline were cultured in NNN media, but leishmania were not isolated from cultures media. Finally from 65 feline spleen tissue DNA extraction for PCR with using specific primers named k-DNA were done but any band linked to leishmania were observed, مقدمه: لیشمانیازیس احشائی یکی ازبیماریهای عفونی انگلی وزئونوتیک درکشورهای حوزه مدیترانه وخاورمیانه ازجمله ایران می باشد. عامل اصلی لیشمانیوزاحشائی درایران لیشمانیااینفانتوم ومخزن اصلی بیماری سگ وسگ سانان می باشد.عفونتهایی ازلیشمانیااینفانتوم درگربه ها نیزبه اثبات رسیده است. این تحقیق جهت بررسی عفونت لیشمانیوز احشائی درمیان گربه های شهرستان آذر شهر ونقش احتمالی گربه ها درانتقال بیماری به انسان باروش پارازیتولوژی،سرولوژی ومولکولی انجام گرفت.موادوروش کار:تعداد 65 گربه توسط تله از روستا های شهرستان آذر شهر جمع آوری شدند و سرم آنها در معرض آزمایش DATبا آنتی ژن لیشمانیا قرار گرفت. رنگ آمیزی گیمسا برای آزمایش پارازیتولوژیکی از بافت های طحال و کبد انجام شد. همچنین نمونه هایی از کبد و طحال گربه ها برای کشت در محیط NNNوآزمایش مولکولی (PCR) استفاده شد.نتایج:از65نمونه 15مورد (23/07) دارای تیترسرمی مثبت و 13 مورد (20%)دارای تیترهای سرمی پائین ترو37مورد (56.92%) سرم منفی بودند.تمام اسمیرهای تماسی تهیه شده ازبافت کبدوطحال موردمطالعه قرارگرفتندکه درآنهاجسم لیشمن مشاهده نشد.قسمتی ازبافت طحال وکبد گربه هادرمحیط کشتNNNکشت داده شدنداماانگل لیشمانیا ازمحیط کشت هاایزوله نشد. درنهایت ازبافت طحال، استخراجDNAصورت گرفت وبااستفاده ازپرایمرهایاختصاصی آزمایش مولکولیPCRانجامشدوباندمربوط به جنس لیشمانیامشاهده نگردید