بررسی آلودگی به لیشمانیوز احشایی با استفاده از روشهای پارازیتولوژیکی، سرولوژیکی و مولکولی در گربه های منطقه اهر در استان آذربایجانشرقی 92-1391

Abstract

لیشمانیازیس احشائی یکی از بیماریهای عفونی– انگلی و زئونوتیک در کشور های حوزه مدیترانه و خاورمیانه از جمله ایران می باشد. عامل اصلی لیشمانیوز احشائی در ایران لیشمانیا اینفانتوم و مخزن اصلی بیماری سگ و سگ سانان می باشد. عفونتهایی از لیشمانیا اینفانتوم در گربه ها نیز به اثبات رسیده است. این تحقیق جهت بررسی عفونت لیشمانیوز احشائی در میان گربه های شهرستان اهر و نقش احتمالی گربه ها در انتقال بیماری به انسان با روش پارازیتولوژی، سرولوژی و مولکولی انجام گرفت.مواد و روش کار: تعداد 65 گربه توسط تله از روستا های شهرستان اهرجمع آوری شدند و سرم آنها در معرض آزمایش DAT با آنتی ژن لیشمانیا قرار گرفت. رنگ آمیزی گیمسا برای آزمایش پارازیتولوژیکی از بافت های طحال و کبد انجام شد. همچنین نمونه هایی از کبد و طحال گربه ها برای کشت در محیط NNNو آزمایش مولکولی (PCR) استفاده شد. نتایج: از 65 نمونه 4مورد (6) دارای تیتر سرمی مثبت و 14 مورد (22%) دارای تیترهای سرمی پائین تر و 47 مورد (72%) سرم منفی بودند. تمام اسمیرهای تماسی تهیه شده از بافت کبد و طحال مورد مطالعه قرار گرفتند که در آنها جسم لیشمن مشاهده نشد. قسمتی از بافت طحال و کبد گربه ها در محیط کشت NNN کشت داده شدند اما انگل لیشمانیا از محیط کشت ها ایزوله نشد. در نهایت از بافت طحال، استخراج DNA صورت گرفت و با استفاده از پرایمرهای اختصاصی آزمایش مولکولی PCR انجام شد و باند مربوط به جنس لیشمانیا مشاهده نگردید., Visceral leishmaniasis is a parasitic infections and zoonotic disease in the countries of Mediterranean basin and Middle East, including Iran. The causative agent of visceral leishmania in Iran is leishmania infantum and dogs and canines are main reservoirs. Infections of leishmania infantum in feline have been proved. The main objective of this investigation was to screen leishmania infection in feline and possible role in transmission of the disease to human by parasitology, serology and molecular methods in ahar District, East Azerbaijan province in 2012-2013.Materials and Methods:Totally 65 cats have been trapped alive from villages of Ahar County and their serum samples subjected to DAT for leishmania antibodies. Giemsa stained impression smears have been prepared for parasitological examination of spleen and liver tissue. Also liver and spleen samples of the cats have been cultured in NNN medium and also used for PCR.Results:Amongst them 4 (6%) seropositive, 18 (22%) had lower titers than positive and 47 (72%) feline were seronegative. The smears were prepared from spleen and liver all animals examined microscopically and did not show any amastigotes. Parts of the spleens and livers of feline were cultured in NNN media, but leishmania were not isolated from cultures media. Finally from 65 feline spleen tissue DNA extraction for PCR with using specific primers named k-DNA were done but any band linked to leishmania were observed.