بررسی سرولوژیکی عفونت توکسوپلاسما گوندی در بیماران نورودژنراتیو (آلزایمر و پارکینسون) و تعیین ژنوتایپ ایزوله ها به روش Sequencing

Abstract

Aim: Due to high prevalence of Toxoplasmosis in Iran and evidence about effects of T. gondii on neurodegenerative diseases, this study has been conducted to serological study of Toxoplasma gondii in neurodegenerative patients (Alzheimer & Parkinson) and genotyping of isolates by sequencing method. Methods and Materials: In this case control study, 75 Alzheimer's and 75 Parkinson's patients and 150 healthy volunteers were enrolled. After obtaining informed consent and filing out questionnaire, 5 ml blood sample was taken and Anti Toxoplasma IgM and IgG tests were performed on serum using ELISA method. DNA was extracted from buffy coat. GRA6 gene and SAG2 locus were amplified by PCR and Nested-PCR techniques respectively. Data were analyzed by chi- square and binary logistic regression using STATA 11 software. Results: 69.3 % of Parkinson's patients, 62.6 % of their control group, 61.3% of Alzheimer's patients and 62.6% of their control group were positive for anti ToxoplasmaIgG antibody. All subjects were found as negative for IgM. Using statistical analysis,there was no significant difference between Parkinsons (P=0.2) and Alzheimer's patients (P=0.5) with their control groups in term of anti ToxoplasmaIgG antibody.Due to lack of positive IgM sample, result of molecular test was negative with GRA6 and SAG2 genes, هدف: به علت شیوع بالای توکسوپلاسموزیس در ایران و مدارکی در مورد تأثیر توکسوپلاسما گوندی بر روی بیماریهای نورودژنراتیو، این مطالعه به منظور بررسی سرولوژیکیعفونت توکسوپلاسما گوندی در بیماران نورودژنراتیو (آلزایمر و پارکینسون) و تعیین ژنوتایپ ایزوله‌صها به روش Sequencingانجام گرفته است. روش کار و مواد: در این مطالعه مورد - شاهدی 75 بیمار مبتلا به آلزایمر، 75 بیمارمبتلا به پارکینسون و 150 فرد سالم وارد مطالعه شدند. بعد از کسب رضایت نامه و پر کردن پرسشنامه، 5 سی سی خون اخذ و بر روی سرم آزمایشIgGو Anti Toxoplasma IgMبا روشELISA انجام گرفت. DNA از نمونه بافی کت استخراج و ژنGRA6 با روشPCR و ژنSAG2 با روش Nested-PCR تکثیر یافت. داده ها با استفاده از آزمون های آماریchi- square و رگرسیون لوجستیک بایناری و نرم افزارSTATA 11 آنالیز گردید. یافته ها: 3/69% از بیماران پارکینسونی، 6/62% از افراد کنترل سالم این گروه و3/61% از بیماران آلزایمری و6/62% از افراد کنترل سالم این گروه از نظر آنتی بادی IgG توکسوپلاسما مثبت بودند. تمام موارد از لحاظ آنتی بادی IgMتوکسوپلاسما منفی بودند. با استفاده از آنالیز آماری، تفاوت معناداری بین بیماران پارکینسونی (2/0= P) و آلزایمری (5/0= P)با گروه کنترلشاناز نظر آنتی بادی IgGضد توکسوپلاسما مشاهده نشد. به علت فقدان نمونه IgMمثبت نتیجه آزمایش مولکولی با ژنGRA6 وSAG2 منفی بود.