تعیین گونه های انگل تریکوسترونژیلوس جدا شده از گوسفندان کشتارگاه استان آذربایجان شرقی با روش های مورفومتری و PCR-RFLP با استفاده از ژن ITS2-rDNA

Abstract

هدف از مطالعه حاضر تشخیص تریکوسترونژیلوس جداشده از گوسفندان با روش مورفولوژی و روش مولکولی بر پایهDNA ریبوزومی بود.انگلها از گوسفندان کشتارشده جمع شده و در الکل 70 درصد نگه داری شدند.ابتدا ما کرمهای نر را با استفاده از کلیدهای تشخیصی مورفولوژی تشخیص دادیم.سپس DNA ژنومی با استفاده از روش استخراج فنل کلروفورم جداسازی شد.PCR برای تکثیر ناحیهITS2 با استفاده از پرایمرهای مخصوص انجام شد. PCR-RFLPبا آنزیم برش دهندهTAS1انجام شد.محصولات PCR و PCR-RFLP روی ژل آگارز الکتروفورز شد. بطور کلی سه گونه تریکوسترونژیلوس شامل تریکوسترونژیلوس کولوبریفورمیس ,تریکوسترونژیلوس پروبولوروس و تریکوسترونژیلوس ویترینوس تشخیص و جداسازی شد.در مرحله PCR باندهای 328 جفت باز ی برای هرسه گونه مشاهده شد.بعد برش محصولا PCR با آنزیم برش دهنده الگوهایخاصی برای هر سه گونه مشاهده شد.الگویRFLPاین آنزیم برای کولوبریفورمیس شامل قطعات 24bp,45bp, 85bp,174bpوبرای ویترینوس شامل قطعات bp111bp,45bp,63bp,85bp,24bp و برای پوروبولوروس شامل قطعات 156 bp,85 bp,63 bp,24 bp, 111bpبه ترتیب بود.