بهینه سازی تکثیر سلولهای بنیادی مزانشیمی جهت استفاده بالینی در پیوند مغزاستخوان
Abstract
In this study, we treated MSCs with umbilical cord blood serum(UCBS), platelet rich plasma(PRP) and platelet rich fibrin(PRF) to evaluate their proliferation. MSCs were isolated from human bone marrow and after confirm their mesenchymal identification by flowcytometery, were cultured in media supplemented with different concentration of UCBS, PRP and PRF. After 2days we detached cells for doing MTT assay and counting doubling time. Then the treatment results were compared with conventional medium contained 10% FBS by excel software. In vitro, UCBS increased MSCs proliferation up to 2.5 fold in a dose dependent way and reduced their doubling time to 15houers. PRP and PRF in their optimized concentration increased MSCs expansion respectively up to 2.36 and 2.30 fold and decreased their doubling time to about 16houers. Indeed, these products do not change cell's mesenchymal characteristics. ,
در این مطالعه MSCها با سرم خون بند ناف(UCBS), پلاسمای غنی از پلاکت(PRP) و فیبرین غنی از پلاکت(PRF) تیمار شدند تا تکثیر آنها بررسی گردد. MSCها از مغزاستخوان انسانی جدا شدند و بعد از تائید ماهیت مزانشیمی آنها با استفاده از فلوسایتومتری, در محیط حاوی غلظتصهای متفاوت UCBS, PRP و PRF کشت داده شدند. پس از 2روز سلولصها به منظور انجام آزمون MTT و محاسبه doubling time جدا شدند. سپس نتایج تیمار با محیط مرسوم حاوی 10% FBS با استفاده از نرمافزار Excel مقایسه شدند.در محیط in vitro, UCBS تکثیر MSCها را به صورت وابسته به دوز تا 5/2 برابر افزایش میصدهد و doubling time آنها را 15ساعت کاهش میصدهد. PRP و PRF در غلظت بهینه تکثیر MSCها را به ترتیب تا 36/2برابر و 30/2برابر افزایش داد و doubling time آنها تا حدود 16ساعت کاهش یافت. به علاوه, این فرآوردهصها ویژگیصهای مزانشیمی سلولصها را تغییر نمیصدهند.