بررسی اثر ضد سرطانی فراکسیونهای متانولی عصاره گیاه دارویی شیر مرغ دیهیمی ( Ornithogalum Cuspidatum Bert)در القای آپوپتوز در رده سلولی سرطانی WEHI-164

Abstract

Ornithogalum cuspidatum, from family of Liliaceae, has been used widely in Iranian traditional medicine for treatment of respiratory and inflammatory disease. Previous study on methanolic extract of Ornithogalum cuspidatum showed that it has anti-tumor effect. Therefore aimed to study the cytotoxic effect of methanolic extract fractions of Ornithogalum cuspidatum on WEHI-164 Fibrosarcoma cancer cell line. Fractions of Methanolic extract of Ornithogalum cuspidatum was prepared using SPE ( Solid Phase Extraction ).WEHI-164 cancer cell line were treated with concentrations of 10%, 20%, 40%, 60%, 80% and 100% fractions of methanolic extract of Ornithogalum cuspidatum, at 12 and 24 hour periods. Cytotoxicity and cell viability were measured by MTT assay. ELISA was performed to determine apoptosis after 24 hour in different concentrations of methanolic fractions. 10% and 20% fractions of methanolic extract had not cytotoxic effect and 40%, 60%, 80% and 100% fractions induced a significant growth inhibition in WEHI-164 cancer cell line with IC50 of 200, 96, 76 and 73 g/ml respectively(p<0.05). Morphological changes of cell death in treated WEHI-164 cell line were mediated via apoptosis., مطالعه حاضر با هدف بررسی اثر سایتوتوکسیک فراکسیونهای مختلف عصاره متانولی گیاه شیر مرغ دیهیمی بر روی سلول های سرطانی WEHI-164 مدل فیبروسارکوما صورت گرفت. فراکسیون های عصاره متانولی پیاز گیاه شیر مرغ دیهیمی با روش SPE ( Solid Phase Extraction) تهیه شد. سلول های سرطانی WEHI-164 با غلظت های مختلف از فراکسیونهای متانولی 10%، 20%، 40%، 60%، 80 % و 100% تیمار شدند و در زمان های 12 و 24 ساعت اثر سا یتوتوکسیسیتی آن ها بر روی سلول های WEHI-164 با روش MTT مورد بررسی قرار گرفت. جهت بررسی القاء آپوپتوز، تست ELISA در غلظت های مختلف از فراکسیون های متانولی در زمان 24 ساعت انجام شد. نتایج تست MTT نشان می دهد که در بین فراکسیون های مورد مطالعه فراکسیون های 10% و 20% فاقد اثر سایتوتوکسیک بوده و فراکسیونهای40%، 60%، 80% و 100% در مقایسه با گروه کنترل دارای اثرات سایتوتوکسیک می باشند(p<05/0). فراکسیونهای40%، 60%، 80 % و 100% پس از 24 ساعت موجب مهار رشد سلول های سرطانی WEHI-164با IC50 به ترتیب 200، 96، 76 و 73 میکرو گرم بر میلی لیترشدند. تغییرات مورفولوژی سلول های تیمار شده با فراکسیون ها، ناشی از آپوپتوز می باشد.