ارزش تشخیص روش Real time quantitative PCR در تشخیص پره ناتال تریزومی 21 در نمونه های آمنیوسیت بارداریهای پر خطر

Abstract

هدف این مطالعه برای ارزیابی کاربرد روش Real - Time qPCR در تشخیص سریع از تولد DS انجام شد . 20-15 میلی لیتر مایع آمینوتیک تحت شرایط استریل گرفته شد .15-12 میلی لیتر آن برای آنالیز سیتو ژنتیک و مابقی برای استخراج DNA مورد استفاده قرار گرفت .ژن های DSCAM و DYRK1A به عنوان ژن های هدف و ژن PMP22 به عنوان ژن مرجع انتخاب شد .آغاز گرهای اختصاصی با استفاده از نرم افزار Primer Express طراحی شدند . ارزیابی Real - Time qPCR با استفاده از واکنش رقت های متوالی جهت ترسیم نمودار استاندارد انجام شد .سپس واکنش برای تمامی نمونه ها انجام شده و نسبت ژنی با فرمول محاسبه گردید .نتایج Real - Time qPCR میانگین نسبت ژن هدف /مرجع را در نمونه های جنینی داون 61/1+09/0 و در نمومه های نرمال 05/0 +03/1 نشان داد . این موضوع حضور سه نسخه از ژن هدف را در جنین های مبتلا و دو نسخه را در جنین های نرمال اثبات کرد . نتایج حاصل با سیتوژنتیک مورد تایید قرار گرفت .