بررسی اثر فاکتور مهاری لوکمیا بر بر میزان تشکیل اووسیت های مرحله GVBD و Cumulous expansion, MII و بیان رسپتور آن در طی Invitro maturation اووسیت موش I

Abstract

In this study expression of gp130 in GV and MII oocytes has been studied. Methods: 5 week mice were superovulated with HMG. After 40-45 hours the mice were sacrificed with cervical dislocation and removed their ovaries. GV oocytes were collected with rupture of ovary and culture in different doses of LIF. After 24 hours culture cumulus expansion, rate of GVBD and MII development were recorded. For detection of expression of gp130 gene RT-PCR and Real-Time PCR were performed. Results: our results showed that in TCM199 with different doses of LIF cumulus expansion in group with 500Iu/ml was higher than 100Iu/ml and group with 1000Iu/ml had highest cumulus expansion and was significant compare to other groups. Cumulus expansion in control group was lower than all groups. Cumulus expansion improvement affects on GVBD and MII development. RT- PCR and Real-Time PCR results showed that gp130 gene is not expressed in GV and MII oocytes, در تحقیق حاضر به منظور بررسی مکانیسم اثر LIF بیان ژن gp130 دراووسیت مرحله ژرمینال وزیکل و متافازII مورد بررسی قرار گرفته است.مواد و روشها: موشهای 5 هفته ای را با تزریق HMG تحریک کرده و پس از 45-40 ساعت با روش جابجایی گردنی قربانی کرده و به منظور جمع آوری تخمک های GV تخمدان ها را پاره کرده و تخمک های همراه با سلولهای کومولوس را جمع آوری و در محیط های کشت کنترل و آزمایش کشت داده و پس از 24 ساعت میزان expansionوGVBD و MII را بررسی کردیم. به منظور بررسی بیان ژن gp130 دراووسیت های مرحله ژرمینال وزیکل و متافاز II از روش RT-PCR و Real-time PCR استفاده شد.نتایج: نتایج حاصل از کشت سلول های ژرمینال وزیکل در محیط کشت TCM199 با مقادیر مختلف LIF نشان داد که میزان expansion در محیط کشت همراه با LIF500IU/ml بیشتر از گروه LIF100IU/ml و در گروه آزمایشی LIF1000IU/ml بیشتر از همه گروه ها و گروه کنترل بود و در این گروه تفاوت معنی داری نسبت به سایر گروه ها بدست آمد. با توجه به افزایش expansion متعاقبا تاثیر آن بر روی میزان GVBD و MII مورد بررسی قرار گرفت و نشان داده شد که میزان GVBD ها در گروه آزمایش LIF500IU/ml بیشتر از بقیه گروهاست و میزان تخمک های MII در گروه LIF1000IU/ml بیشتر از بقیه می باشد. در تحقیق حاضر نتایج حاصل ازRT- PCR و Real- Time PCR نشان داد که ژن gp130 در این دو مرحله در اووسیت موش بیان نمی شود.