بررسی موتاسیون‌های ژن DHFR در پلاسمودیوم ویواکس به روش PCR-RFLP در تعدادی از ایزوله های مناطق مالاریا خیز کشور

Abstract

با گسترش جهانی مقاومت به كلروكین در پلاسمودیوم ویواكس، داروی تركیبی سولفادوكسین-پریمتامین (SP) اكنون بعنوان خط اول درمانی در بسیاری از كشورها استفاده میشود. در ایران عفونتهای توام پلاسمودیوم ویواكس و پلاسمودیوم فالسیپاروم رایج هستند. در چنین شرایطی عفونتهای ناشی از پلاسمودیوم ویواكس تحت فشار دارویی ناشی از Sp قرار می گیرند. در مطالعه حاضر توزیع فراوانی موتاسیونها در ارتباط با مقاومت SP در ژن P.vdhfr در تعدادی از ایزوله های فیلد بررسی شدند.مواد و روشها:50 نمونه بالینی پلاسمودیوم ویواكس در طی سالهای 1387-1386 از چهار استان جنوبی و جنوب شرقی كشور ( سیستان وبلوچستان، هرمزگان، كرمان و بوشهر) جمع آوری شدند. تمام 50 نمونه جمع آوری شده برای بررسی وجود موتاسیون در موقعیت كدونهای 57 ،58 ،61 و 117 ژن P.vdhfr و تعیین هاپلوتایپها بوسیله روش PCR-RFLP مورد آنالیز و بررسی قرار گرفتندنتایج:در تمام 50 نمونه مورد آزمایش در كدونهای 57 و61 كدونهای مربوط به آمینو اسیدهای وحشی یافت شدند. این در حالی است كه در كدونهای 58 و 117 به ترتیب در 12%و 36% نمونه ها موتاسیون یافت شدند. در میان نمونه های مورد آزمایش 5 هاپلوتایپ یافت شدند. شایعترین هاپلوتایپها F57S58T61S117 (62%) و F57S58T61N117(24%) بودند و سه الل دیگر با موتاسیونهای یك نقطه ای F57R58T61S117و F57R58T61T117و دو نقطه ای F57R58T61N117 به ترتیب در 12%،2% و10% ایزوله ها یافت شدند., With the global spread of chloroquine resistance in Plasmodium falciparum, the combination of sulfadoxine and pyrimethamine(S-P) is now used as first-line antimalarial treatment in an increasing number of countries.In Iran, co-infections of Plasmodium vivax and Plasmodium falciparum are common and P. vivax infections are often exposed to sulphadoxine pyrimethamine (SP). In the present study, the frequency distribution of mutations associated to SP resistance was investigated in pvdhfr gene from Some field isolates. Methods: 50 Clinical isolates of P. vivax were collected from four southern and east-southern provinces of country, sistan and bluchestan, Hormozgan, Kerman and Bushehr in 2008. All 50 collected isolates were analysed for SNP/haplotypes at positions 57, 58, 61 and 117 of the pvdhfr gene using PCR-RFLP methodsResults:All 50 examined isolates were found to carry wild-type amino acids at positions 61 and 57, while 58R and 117N mutations in pure form was detected among 12%, and 36% examined samples, respectively. The pvdhfr haplotypes among all 50 samples demonstrated five distinct haplotypes. The two most prevalent haplotypes among all examined samples were F57S58T61S117 (62%) and F57S58T61N117 (24%). three other alleles with one point mutation F57R58T61S117, F57R58T61T117 and two mutations F57R58T61N117 accounted for 2%, 2%and 10% of the total isolates.