تعیین تنوع ژنومی ژیاردیائودنالیس جدا شده از مخازن انسانی و دامی به روش PCRRFLP در شهر تبریز

Abstract

هدف از این مطالعه تعیین تنوع ژنومی ژیاردیادئودنالیس جدا شده از مخازن انسانی و دامی به روش PCRRFLP در شهر تبریز می باشد. تعداد نمونه مدفوع انسانی، موارد اسپورادیک ابتلا به ژیا325وزیس، نمونه مدفوع گاو، نمونه مدفوع گربه و نمونه مدفوع سگف توسط تکنیکهای 100ول آزمایشگاهی (دید مستقیم 60کروسکوپی و تغلیظ رسوبی فرمالین60تر) از نظر وجود کیست ژیاردیا مورد بررسی قرار گرفتند. دو ابزار ژنوتیپینگ PCR و PCRRFLP به منظور تمایز ژنومی ایزوله های ژیاردیا دئودنالیس مشابه از نظر مورفولوژیکی، از گونه های مختلف میزبانی، مورد استفاده قرار گرفتند. به منظور تمایز سویه ها، پروفایلهای آنزیمی محدودالاثر برای هر یک از اسمبلاژهای ژنتیکی با دو آنزیم NLa IV و Rsa I تعیین گردیدند. از مجموع نمونه های بررسی شده، نمونه انسانی و یک نمونه حیوانی (گربه) طی آزمایش PCR مثبت گردیدند. آنالیز سکانس قطعه bp ژن گلوتامات دهیدروژناز تکثیر یافته، شباهت این توالی با سکانس های ایزوله های ژیاردیای ثبت شده در بانک ژنی را نشان می دهد (ماکزیمم تشابهی برابر با درصد). آنالیز الگوی RFLP ایزوله های ژیاردیا دئودنالیس انس31ی، نمونه را در زیر گروه ژنتیکی AII، نمونه را در زیر گروه ژنتیکی BIII و نمونه را در زیر گروه ژنتیکی BIV تقسیم نمود. در بین ای432ه های مربوط به گربه یک ایزوله در زیر گروه ژنتیکی AI قرار گرفت. هیچ محصولی از DNA استخراج شده از کیست های خالص شده ژیاردیای دئودنالیس جدا شده از گاو و سگ تکثیر نیافتند. از بین نمونه DNA استخراج شده، ژن تریوز فسفات 99زومراز، طی دو واکنش مجزای APCR و BPCR در نمونه تکثیر یافت. از این تعداد نمونه مر6وط به اسمبلاژ B، نمونه مربوط به اسمبلاژ A و8یک نمونه میکس شامل هر دو اسمبلاژ A و B بودند