ساخت و بررسی اسکفولد های کلاژنی جهت رشد و تکثیر سلول های اندومتری به منظور ترمیم بافت اندومتر

Abstract

مقدمه: نیاز روزافزون به ترمیم بافت اندومتر و محدودیت های درمان های رایج سبب شده که استفاده از مهندسی بافت به عنوان رویکردی نوین در ترمیم بافت آسیب دیده اندومتر مورد توجه قرار گیرد.هدف: طراحی و تهیه داربست های پایه کلاژنی، جهت کشت سلول های مزانشیمی بند ناف جنینی (HUC-MSCs) بر روی آن و بررسی تاثیر این سیستم در افزایش رشد و تکثیر سلول های اندومتری.روش کار: در این مطالعه، داربست های COL/PVA به روش الکتروریسی سنتز شده و با FTIR و SEM مشخصه یابی شدند. نانوالیاف با GA کراس لینک شده و در نهایت یک داربست نانوفایبری پایدار تهیه گردید. با بهینه کردن نسبت COL/PVA نیاز به کراس لینک نانوفایبرها از بین رفت و یک داربست نانوفابیری پایه کلاژنی بدون کراس لینک تهیه شد. مورفولوژی، تخلخل، نسبت تورم، زیست تخریب پذیری و رفتار مکانیکی داربست ها مورد مطالعه قرار گرفت. پاسخ های بیولوژیکی سلول های HUC-MSCs از نظر زنده‌مانی و چسبندگی سلولی بر روی داربست های سنتز شده ارزیابی شد. در نهایت تاثیر HUC-MSCs بارگذاری شده بر روی داربست ها در رشد و تکثیر سلول های اندومتری (HESCs) به روش همکشتی مورد بررسی قرار گرفت.یافته ها: مطالعات نشان داد که داربست‌هایی زیست تخریب پذیر با مورفولوژی متخلخل و ساختار پایدار به‌دست آمده اند. هیچ یک از داربست ها بر سلول های HUC-MSCs اثر سمی نداشتند. ولی حذف عامل GA و افزایش غلظت COL سبب شد پس از گذشت 72 ساعت میزان زنده مانی سلول ها بر روی داربست ها نسبت به گروه کنترل و گروه های تست دیگر به شکل معنی داری افزایش یابد. HUC-MSCs بارگذاری شده بر روی داربست های نانوفایبری COL/PVA کراس لینک نشده v1/v2))40/60 برای ادامه مطالعه تحت همکشتی با HESCs قرار گرفتند. بررسی بیان پروتئین KI67 افزایش 7/39% را در گروه های HESCs همکشتی شده با HUC-MSCs لود شده بر داربست های نانوفایبری COL/PVA نسبت به گروه های کنترل (کشت HESCs) نشان دادند.نتیجه گیری: داربست‌های نانوفایبری COL/PVA از لحاظ فیزیکوشیمیایی برای استفاده در مهندسی بافت نرم مناسبند. این داربست ها محیطی مناسب برای لانه گزینی و رشد HUC-MSCs را فراهم کرده و قابلیت استفاده در ترمیم بافت اندومتر را دارند.