القای آپوپتوز در رده ی سلولی K562 با استفاده از TRAIL و SAHA و بررسی ژن های مرتبط با مقاومت به TRAIL

Abstract

درمان سرطان ها همچنان یک نگرانی قابل توجه برای محققان است و مطالعات متعددی برای حل این مشکل در این زمینه انجام شده است. TRAIL (لیگاند القا کننده آپوپتوز مرتبط با فاکتور نکروز دهنده تومور) یک عامل در خور نگرش است که به گیرنده های مرگ خود متصل می شود و بسیاری از سلول های سرطانی را به سمت آپوپتوز سوق می دهد. با این حال، برخی از بدخیمی ها مقاومت قابل توجهی به آپوپتوز با TRAIL نشان می دهند که این مسئله ایجاد یک چالش برای دانشمندان پویا در این زمینه کرده است. ما در اینجا، برای بررسی امکان غلبه به این مقاومت ، درمان ترکیبیِ TRAIL با SAHA (سوبرویل آنیلید هیدروکسامیک اسید) در رده سلولی K562 را مورد آزمایش قرار دادیم. مواد و روش ها : ابتدا با آزمون MTT ، محاسبه ی IC50 برای SAHA (2 میکرومولار) در زمان های 12، 24، 48 و 72 ساعت انجام شد. در مرحله ی بعد، سلول‌های K562 با غلظت‌های 50 و 100 نانومولارِ TRAIL به تنهایی و همچنین این غلظت ها به همراه غلظت 2 میکرومولارِ SAHA به‌ مدت 24، 48 و 72 ساعت تیمار شدند و میزان بقای این سلول‌ها پس از رنگ‌آمیزیِ Annexin-V و PI با فلوسایتومتری اندازه گیری شد. . در پایان، با انجام Real-time PCR، میزان بیان ژن ‌های کاندیدِ دخیل در مقاومت به TRAIL ارزیابی شد. برای مقایسه داده‌ها و تجزیه و تحلیل آن‌ها از آنالیز واریانس دوطرفه با آزمون‌های مقایسات چندگانه Tukey و Dunnett استفاده شد و نتایج سه آزمایش جداگانه به عنوان میانگین ± SEM ارائه شد و مقادیر P کمتر از 0.05 از نظر آماری معنی دار تلقی شد. نتایج : درمان ترکیبی SAHA با TRAIL به شدت باعث القای آپوپتوز در سلول های K562 پس از 24، 48 و 72 ساعت تیمار شدن با این دارو ها ، شد. به علاوه بیان ژن های DR4 ، DR5 و CHOP افزایش یافته و بیان ژن های PI3K ، Akt، ERK، STAT3 ، c-FLIP و NF-κB توسط این درمان ترکیبی کاهش یافت.