استفاده از حلال های اوتکتیک عمیق به منظور اندازه گیری ایندوکسیل سولفات در پلاسمای بیماران کلیوی

Abstract

مقدمه: ایندوکسیل سولفات (IS)، نقش مهمی در ایجاد بیماری های مختلفی به ویژه بیماری های قلبی-عروقی و بیماری مزمن کلیوی دارد. از اینرو، غلظت این نشانگر زیستی در مایعات بیولوژیکی می تواند به عنوان یک ابزار تشخیصی باشد. بنابراین، روش‌های کمی جهت تعیین مقدار کمی IS در مایعات بیولوژیکی وجود دارد که انجام اکثر آنها به زمان و هزینه زیادی نیاز دارند.هدف: هدف از این مطالعه ارائه یک روش آنالیزی سریع و کارآمد برای اندازه گیری IS در پلاسما از طریق تکنیک استخراج با حلال اوتکتیک عمیق (DES) و روش اسپکتروفلوریمتری می باشد.روش کار: پروتئین نمونه های پلاسما توسط تری کلرو استیک اسید(TCA) ترسیب داده شدند. سپس، DES برای استخراج IS اضافه شد. نمک K2HPO4 برای تشکیل یک سیستم دو فازی آبی اضافه شد. شدت فلورسانس IS که ابتدا به فاز غنی از DES استخراج و سپس به فاز غنی از نمک استخراج شد با روش اسپکتروفلوریمتری اندازه گیری گردید. برخی از عوامل کلیدی مانند pH، سرعت و زمان سانتریفیوژ، نسبت حجمیDES/K2HPO4 و غلظت نمک بهینه شدند.نتایج: تحت شرایط بهینه، روش ارايه شده دارای محدوده ی خطی بین 20-160 میکروگرم بر میلی لیتر با ضریب تعیین (R2) 0.98 می باشد. انحراف استاندارد نسبی کمتر از 15 درصد و دقت در غلظت های مناسب 15 درصد بود. علاوه بر این، نتایج نشان داد که سطوح IS در نمونه های واقعی بالاتر از 40 میکروگرم بر میلی لیتر بود که مطابق با سطوح IS گزارش شده در بیماران CKD می باشد. بحث: در این مطالعه یک روش آنالیزی سریع و کارآمد جهت تعیین مقدارIS در پلاسما از طریق تکنیک استخراج به وسیله یDES و اندازه گیری آن از طریق روش اسپکتروفلوریمتری ارائه گردید. نتایج نشان می دهد که روش آنالیزی ارائه شده به طور بالقوه می تواند برای تعیین IS در نمونه های پلاسمای واقعی استفاده گردد.