مطالعه تغییرات بیان مولکول های کنترلگر ایمنی در رده های سلولی سرطانی معده تحت تاثیر لیزات سلولی لیشمانیا اینفانتوم

Abstract

لیشمانیوز احشایی مدیترانه ای بیماری زئونوزی است که توسط لیشمانیا اینفانتوم ایجاد می شود. ایران یکی از مناطق اندمیک این بیماری است. سگ و سگ سانان میزبانان مخزن اصلی لیشمانیا اینفانتوم هستند. در صورتی که بیمار مبتلا به لیشمانیوز احشایی درمان نشود، در 90% موارد منجر به مرگ می شود. فرار تومور از سیستم ایمنی یکی از مهم ترین نشانه های پیشرفت سرطان است. تومورها توانایی القای بیان مولکولهای مرتبط با نقاط وارسی سیستم ایمنی جهت مهار پاسخ های ضد توموری را دارند. مولکول های سرکوبگر سیستم ایمنی از مهم ترین موانع در درمان سرطان به شمار می روند. این مولکول ها نقاط وارسی سیستم ایمنی نامیده می شوند که بر روی سلول های سرطانی بیان می شوند و به گیرنده های خاص خود بر روی سلول های سیستم ایمنی متصل شده و با فعالسازی مسیرهای سیگنالینگ باعث مهار این سلول ها می شوند. پروتیین های PD-L1 و CD80 از جمله مهم ترین این مولکول ها می باشند که تومور با بیان آن ها از پاسخ سیستم ایمنی ممانعت به عمل می آورد در نتیجه سیستم ایمنی مهار و رشد تومور اتفاق می افتد. بیان این مولکول ها توسط miRNA های کنترل‌کننده‌ی آن‌ها سرکوب می‌شود و احتمالاً جزء بیومارکرهای پاسخ دهنده به درمان نیز کاربرد دارند. miR ها نقش عملکردی خود را در تنظیم بیان ژن با اتصال به UTR`3 ژن هدف ایفا می‌کند. هدف از این مطالعه، بررسی بیان این ژن‌ها و miRNA های کنترل‌کننده‌ی آن‌ها در تیمار با لیشمانیا اینفانتوم می‌باشد. مواد و روش‌ها: رده‌ی سلولی سرطان معده در محیط کشت مربوطه کشت داده شد سپس با لیزات لیشمانیا اینفانتوم تیمار شد. بعد ار گذشت 24 ساعت استخراج RNA، و سپس cDNA سنتز شد. در نهایت تغییرات بیان ژن‌های, CD80 PD-L1 و miRNA های کنترل‌کننده‌ی آن‌ها به‌ وسیله‌ی qRT-PCR در تیمار با لیزات لیشمانیا اینفانتوم تعیین شد. یافته‌ها: تست qRT-PCR تغییرات بیان ژن‌های CD80 وPD-L1 و miRهای کنترل‌کننده‌ی آن‌ها را در تیمار با لیشمانیا اینفانتوم نشان داد که در میزان بیان ژن CD80 وPD-L1 کاهش مشاهده شد، و در میزان بیان miR-424 و miR-155 افزایش معناداری مشاهده شد.