طراحی و ساخت سیستم آنالیزی مبتنی بر نانومواد برای تشخیص اسید نوکلئیک در تراشه میکروسیالی
Abstract
مقدمه: بیماری های قلبی عروقی علت اصلی مرگ و میر در سراسر جهان به شمار می روند (1). طي چند دهه گذشته بیماری سرخرگ های کرونر وانفارکتوس میوکارد عامل درجه اول مرگ در كشورهای صنعتي بوده است، ولي طي همین مدت با شناخت هر چه بیشتر عوامل خطر، كنترل هر چه بهتر آنها در افراد مبتلا به این عوامل، سن ابتلا به بیماری تنگی سرخرگ های كرونر و مخصوصا سکته حاد قلبي در این گونه کشورها افزایش یافته است(2).بنابراین فاکتورهای دخیل در این بیماری از اهمیت تشخیصی بسزایی جهت کنترل و درمان بیماری برخوردار هستند.
مواد وروش ها: طراحی تراشه میکروسیال توسط نرم افزار corell draw انجام شد وتراشه با بستر پلی دی متیل سیلوکسان ساخته شد. طراحی پروب مدنظر توسط سایت ابزار انلاین mfold انجام شد و سفارش سنتز داده شد. سنتز نانوذره هسته –پوسته مگنتیک مورد نظر توسط روش هم رسوبی نمک های فریک و فروس انجام شد و پوسته ی طلا با روش احیای طلا توسط سیترات بر روی هسته اهنی تشکیل شد..شدت نور فلورسانس دریافتی مشاهده وبا کمک پلیت ریدر فلورسانسی مجهز به لام ریدر خوانش شد. با سنجش شدت فلورسانس ایجاد شده در غلظت های مختلف هدف، امکان رسم منحنی های کالیبراسیون برای غلظت سنجی توالی هدف مورد نظر ونیز گزارش LOD وLOQ روش تشخیصی توسعه داده شده فرآهم شد.
نتیحه گیری: طراحی وساخت نانوبیوسنسور بکار رفته در این مطالعه بر اساس ایجاد سیگنال فلورسانس از طریق هیبریداسیون بین پروب مولکلار بیکون نانویی وmiRNA هدف بود. از نانوذره هسته-پوسته آهن-طلا به دو منظور استفاده گردید. تجمع مناسبی از نانوذرات به دلیل هسته ی مگنتیک خود در کنار آهنربای تعبیه شده در محل تشخیص بر روی تراشه ساخته شده ایجاد گردید که سبب افزایش حساسیت تشخیص می شود. همچنین پوسته ی طلای نانوذره می تواند خاصیت خاموش سازی مناسبی برای پروب مولکلار بیکون مدنظر داشته باشد.
واژگان کلیدی: تراشه میکروسیال، نانو ذرات هسته-پوسته آهن طلا، تشخیص miRNA، بیماری های قلبی –miRNA499