بررسی بیان ژن TLR5 در سلول¬های اپیتلیال واژینال انسانی در عفونت با تریکوموناس واژینالیس

Abstract

تریکومونیازیس یک بیماری منتقله از طریق جنسی است که توسط تریکوموناس واژینالیس ایجاد می¬شود.TLR ها خانواده¬ای ازpattern recognition receptors هستند که در انواع سلول¬های پستانداران بیان شده و نقش مهمی در تشخیص پاتوژن¬ها و پاسخ¬های التهابی دارند. در مطالعه حاضر، نقش TLR5 در سلول¬های HeLa و سلول¬های اپیتلیال واژینال انسانی مواجهه شده با انگل تریکوموناس واژینالیس مورد بررسی قرارگرفت. مواد و روش کار: تریکوموناس واژینالیس در محیط کشت TYM و سلول¬های HeLa و HVEC در محیط RPMI کشت داده شدند. پس از سازگار کردن انگل و سلول¬ها با محیط کشت مشترک RPMI-TYM (9:1)، سلول¬های HeLa و HVEC به مدت 24 ساعت در مواجهه با نسبت¬های مختلف انگل قرار داده شدند. بعد از استخراج RNA و سنتز cDNA، ژن‌های TLR5، IRAK و NF-κB با استفاده از real-time PCR مورد ارزیابی قرار گرفتند. همچنین میزان پروتئین TLR5 و NF-κB با وسترن بلات بررسی شد. یافته¬ها: نتایج real-time PCR نشان داد بیان ژن¬های TLR5، IRAK و NF-κB در سلول¬های HeLa و HVEC مواجهه داده شده با تریکوموناس واژینالیس به طور معنی¬داری افزایش یافته بود(P<0.05) . نتایج وسترن بلات افزایش معنی¬داری را در پروتئین¬های TLR5و NF-κB در 1X, 3X و 5xسلول¬های HeLa و در سلول¬های HVEC فقط در 5X نشان داد .(P<0.05)