مهار ترکیبی IL-6 و CD73در سلول های سرطانی با استفاده از نانوذرات بارگیری شده با مولکول های

Abstract

فاکتورهای بسیاری در ریزمحیط توموری حضور دارند که بیان افزایش یافته آنها نقش بسیار مهمی را در گسترش سرطان ایفا می کنند. بیان افزایش یافته آدنوزین و IL-6 در ریزمحیط تومور منجر به گسترش سریع سلول های سرطانی و مهار پاسخ های ایمنی ضدتومور می شود. یکی از راههای موثر ایمونوتراپی، مهار ترکیبی فاکتورهای پیشبرنده تومور است. از اینرو در این مطالعه تصمیم گرفتیم که بیان فاکتورهای CD73 (فاکتور اصلی تولیدکننده آدنوزین) و IL-6 در سلول های سرطانی را سرکوب نماییم. بدین منظور، از نانوذرات بارگیری شده با siRNA استفاده گردید. مواد و روش¬ها: در این مطالعه به منظور انتقال siRNA به سلول های سرطانی از نانوذرات تری متیل کیتوزان کونژوگه شده با آلژینات استفاده گردید. اثرات ضد سرطانی ترکیب فوق بر روی سه رده سلولی سرطان 4T1(سرطان پستان) ، B16 (ملانوما) ،و CT26 (سرطان روده بزرگ) ارزیابی گردید. خواص فیزیکوشیمیایی نانوذرات سنتز شده با استفاده از دستگاه DLS انجام پذیرفت. همچنین قدرت بارگیری siRNA و پایداری نانوذرات با استفاده از ژل الکتروفورز مطالعه شد. همچنین بیان ژن های هدف با استفاده از تکنیک Real-time PCR انجام شد. علاوه بر این، توکسیسیتی نانوذرات تولید شده بوسیله روش MTT بررسی گردید. یافته ها : نتایج مطالعه نشان داد که نانوذرات اندازه ای در حدود ~110 nm ، PDI < 0.2 و پتانسیل زتا 18 mV داشتند. بررسی میکروسکوپ الکترونی نشان داد که نانوکمپلکس ها مورفولوژی کروی داشته و ظرفیت بالایی برای بارگیری siRNA داشتند. علاوه بر این نانوذرات پایداری زیادی در سرم داشتند. بررسی کونفوکال میکروسکوپی نشان داد که سلول های سرطانی بصورت معناداری نانوذرات را جذب می کنند که منجر به سرکوب بیان ژن های هدف می گردد. همچنین، درمان ترکیبی نشان داد که هرچند نانوذرات به تنهایی سمیت چندانی بر روی سلول های سرطانی ندارند اما درمان ترکیبی می تواند بصورت چشمگیری موجب کاهش بقای سلول های سرطانی گردد.