تعیین تغییرات بیان ژن‌های درگیر در مسیر بلوغ (micro RNA ها DROSHA, DICER, DGCR, AGO) در بیماران مبتلا به ناشنوایی ناگهانی

Abstract

هدف از انجام این مطالعه بررسي تغییرات بیان ژن‌های درگیر در مسیر بلوغ microRNA ها در بیماران مبتلا به ناشنوایي ناگهاني مي‌باشد. مواد و روش‌ها: در این مطالعه که از نوع مطالعات مورد شاهدی است. حجم نمونه در هر یک از گروه‌های مورد مطالعه (کنترل –بیمار) 40 نمونه بود به طوری که در گروه بیمار 40 فرد مبتلا به SSNHL که بیماری آن‌ها توسط پزشک متخصص تائید شده است و در گروه شاهد 40 فرد سالم فاقد آسیب‌های شنوایي که از نظر بیولوژیک با گروه بیمار همسان بودند، مورد بررسي قرار گرفتند. پس از اخذ رضایتنامه کتبي از افراد شرکت کننده (به میزان 5 میلی لیتر خون اخذ شد)، ابتدا PBMC ها جدا شده و سپس سریعا به دمای 80- منتقل شد. پس از جمع‌آوری نمونه‌ها RNA با استفاده از محلول ترایزول استخراج شده؛ سپس با استفاده از کیت‌های مخصوص سنتز cDNA اقدام به سنتز cDNA برای ژن‌ها شد. در نهایت با بهره‌گیری از تکنیک Real Time PCR و با استفاده از پرایمرهای اختصاصي ژن‌های مورد نظر، اقدام به ارزیابي میزان بیان ژن‌های هدف در نمونه‌ها نمودیم جهت نرمال سازی داده‌ها در این بررسی از میزان بیان ژن GAPDH استفاده نمودیم. یافته‌ها: در این مطالعه، میانگین و انحراف معیار سني دو گروه بیمار و سالم ، به ترتیب 48/55 (3/2±) و 80/56 (6/2±) سال بود. در گروه افراد بیمار مبتلا به SSNHL، سمت درگیری شنوایي به ترتیب در 18 مورد( 0/45 درصد) چپ و در 22 مورد( 0/55 درصد) راست بود. برحسب شدت کاهش شنوایي در گروه افراد گروه بیمار در 4 گروه ملایم، متوسط ،شدید و عمیق قرار گرفتند که هر گروه به ترتیب 10 مورد (0/25 درصد)، ، 18 مورد (0/45 درصد)، مورد (5/17 درصد) و 5 مورد (5/12 درصد) بود. نتایج حاصل از بررسی بیان ژن‌ها ، کاهش معنی‌دار ژن‌های DICER و DGCR در بیماران SSNHL نسبت به گروه کنترل را نشان داد؛ این در حالی است که بیان دو ژن دیگر با وجود تغییرات در دو گروه در محدوده معنی‌داری قرار نداشت.