تعیین اثر اگزوزوم های مترشحه از رده سلولی سرطان معده بر خصوصیات رگ زایی رده سلولی اندوتلیال HUVEC

Abstract

سرطان معده پنجمين سرطان شایع و سومین سرطان کشنده در جهان است. در ایران سرطان معده شایع ترین سرطان در مردان و سومین در زنان است. برخلاف کشورهای پیشرفته، میزان بروز این سرطان در ایران در حال افزایش است به نحوی که در مناطق شمال و شمال غرب به عنوان یک معضل مطرح می شود. اگزوزوم ها وزیکول های هموژن غشایی با قطر 40 تا 150 نانومتر هستند که از اگزوسیتوز وزیکول های درون سلولی مشتق شده و وقتی به فضای خارج سلولی آزاد می شوند که با غشای سلولی امتزاج یابند. اگزوزوم های مشتق از تومور یا به صورت موضعی آزاد می شوند و یا به داخل جریان خون وارد می شوند تا با سلولهای هدف خود که می تواند سلول های ایمنی باشد، برهمکنش نمایند.

روش کار و مواد. رده سلولی MKN-45 در محیط کشت RPMI1640کشت داده شده و اگزوزوم های ترشحی استخراج می گردد. سلول های HUVEC به عنوان مدل سلولی اندوتلیوم نیز کشت شده و تحت اثر اگزوزوم های تخلیص شده از رده سلولی MKN-45 قرار می گیرند. RNA سلول ها استخراج شده و پس از سنتز cDNA، با استفاده از real-time PCR کمی mRNA و miRNA های کنترل کننده بیان ژن های مرتبط با رگ زایی (miRNA های mir-155، mir-106b و mir-21 و ژن هدف ، VEGF و HIF-1α) بررسی خواهند شد. یافته ها. در معرض قرارگرفتن سلول های HUVEC با اگزوزوم های تخلیص شده از رده سلولی MKN-45 باعث ایجاد تغییراتی در بیان ژن های مرتبط با رگ زایی این سلول ها گردید. بر اساس نتایج حاصل از مطالعه بیان miRNA های mir-106b و mir-21 در سلول های تیمارشده با اگزوزوم های مذکور در مقایسه با سلول های تیمارنشده افزایش معناداری پیدا کرد هرچند بیان mir-155 کاهش یافت. بیان ژن هدف (VEGF و HIF-1α) در سلول های تیمارشده با اگزوزوم ها در مقایسه با سلول های تیمارنشده افزایش معناداری پیدا کرد.