dc.contributor.advisor | رهبرقاضی, رضا | |
dc.contributor.advisor | ابهری, علیرضا | |
dc.contributor.author | شکراللهی, الهامه | |
dc.date.accessioned | 2021-10-19T07:15:11Z | |
dc.date.available | 2021-10-19T07:15:11Z | |
dc.date.issued | 1398 | en_US |
dc.identifier.uri | http://dspace.tbzmed.ac.ir:8080/xmlui/handle/123456789/65292 | |
dc.description.abstract | پروتئین¬های شوک حرارتی در تنظیم فعالیت سلول¬های مختلف در پاسخ به انواع تحریکات شرکت می¬کنند. تنظیم پروتئین¬های شوک حرارتی با استفاده از استراتژی¬های مختلف، مورد توجه واقع شده است. به¬خاطر وجود مسائلی مانند سمیت و ایمنوژنیستی روش¬های رایج انتقال مواد کاملاً مورد تأیید نیستند. اگزوزوم¬ها به-عنوان بیوشاتل¬هایی برای تحویل بیومولکول¬های مختلف به داخل سلول¬ها مورد توجه قرار گرفته¬اند. در این مطالعه از اگزوزوم¬های کمپلکس شده با siRNA ضد HSP27 برای مهار HSP27 در رده¬ی سلولی نوروبلاستومای انسانی SH-SY5Y استفاده شد و تمایز آن¬ها به سلول¬های شبه نورونی مورد بررسی قرار گرفت.
روش کار: اگزوزوم¬ها استخراج شده و به¬وسیله¬ی SEM و پروتئین CD63، مارکر سطحی اگزوزوم، با متد الایزا شناسایی شده، سپس با siRNA-HSP27 کمپلکس شدند. سلول¬های نوروبلاستوما به¬مدت 24 ساعت با این اگزوزوم¬های ترانسفکت شده انکوبه شدند. میزان ترانسفکشن با متد ایمنوفلورسنس و زنده¬مانی و تکثیر سلولی با استفاده از روش MTT و سنجش BrdU، توانایی سلول¬ها برای تشکیل کلنی با روش کلونوژنیک اسی، پتانسیل سلولی برای بیان NeuN، مارکر نورون بالغ، با روش فلوسایتومتری مورد آنالیز و مطالعه قرار گرفتند.
یافته¬ها: SEM اندازه و مورفولوژی نانوذرات را نشان داد و الایزا سطوح بالایی از مارکر پروتئینی CD63 را بعد از غنی¬سازی اگزوزوم شناسایی کرد. تصویربرداری ایمنوفلورسنس میزان ترانسفکت مناسب سلولی را در سلول¬های تیمار شده با اگزوزوم کمپلکس شده با siRNA-HSP27 نشان داد. زنده¬مانی و تکثیر سلولی در این گروه در مقایسه با سلول¬های دریافت¬کننده¬ی اگزوزوم خالی، کاهش یافت (p<0.05). با مهار HSP27 فعالیت کلونوژنیک سلول¬ها کاهش یافت. آنالیز¬های فلوسایتومتری نشان دادند که مهار HSP27 میزان NeuN، بلوغ سلول¬های SH-SY5Y را، در مقایسه با گروه کنترل کاهش داد (p<0.05). | en_US |
dc.language.iso | fa | en_US |
dc.publisher | دانشگاه علوم پزشکی تبریز، دانشکده پزشکی | en_US |
dc.subject | رده¬ی سلولی نوروبلاستومای انسانی | en_US |
dc.subject | اگزوزوم | en_US |
dc.subject | HSP27 | en_US |
dc.subject | تمایز | en_US |
dc.title | بررسی اثر مهار ژن HSP27 با siRNA کمپلکس شده با اگزوزوم بر رشد و تمایز سلول¬های نوروبلاستومای انسانی رده SH-SY5Y | en_US |
dc.type | Thesis | en_US |
dc.contributor.supervisor | نورآذریان, علیرضا | |
dc.identifier.docno | 609917 | en_US |
dc.identifier.callno | 9917 | en_US |
dc.description.discipline | بیوشیمی بالینی | en_US |
dc.description.degree | کارشناسی ارشد | en_US |