بهینه سازی تکثیر و فعالیت سلولهای تی جهت استفاده در متد های ایمونوسل تراپی

Abstract

مقدمه دراین بررسی با استفاده از aAPC برپایه سلولهایK562 بیان کننده کمک‌‎محرک ICOSL الگوی تغییرات رشد و تمایز سلولهای-T درحضور این سیگنال کمک‌محرکی بررسی شد. همچنین تاثیرات حضور فرآورده ژل وارتون‌آسلولار و نیز فرآورده لیزات پلاکتی به عنوان مکمل‌های محیط کشتی، برروی الگوی تکثیر و تمایز زیردسته‌های سلولهایT مورد بررسی قرار گرفت. مواد و روشها سلول‌های T-CD3+جدا شده از اهداکنندگان سالم، در محیط حاوی K562-ICOSL کشت داده شد، منحنی رشد سلولی و همچنین بیان مارکرهای سطحی انتخابی زیردسته‌های اصلی سلولT به روش فلوسیتومتری و بیان ژنهای مرتبط با عملکرد هرکدام از زیردسته‌ها به روش Realtime-PCR ارزیابی شد. نتایج درمجموع حضور ICOSL به تنهایی تاثیر معنی‌داری بر سرعت رشد سلول‌ها در زمان دوبرابر شدن نداشت ولی وجود PL (p=0.032) و AWJ (p=0.043) تاثیر معنی‌داری نشان داد. درصد بیان CD4+ در روز دهم، به میزان 7/23% وبه طور معنی‌داری کاهش داشت (p=0.034)، همچنین الگوی سلول‌های CD25+FoxP3+ از 3/2درصد در گروه کنترل به 6/13 در روز دهم رسیده بود که از لحاظ آماری معنی‌دار بود (p=0.029). بیان IL-2 بین روزهای ششم و دهم به طور معنی‌داری کاهش داشت (p=0.048)، همچنین بیان INF-γ کاهش داشت که از لحاظ آماری معنی‌دار بوده است (p=0.041)، بیان گرآنزیم-A و TGF-b نسبتا افزاینده بوده ولی از لحاظ آماری معنی‌دار نبود (p>0.05). میانگین زمان دوبرابر شدن جمعیت سلولی در گروه کنترل 42.6±1.9 ساعت، برای گروه 1:1، 11.65±0.63 برای گروه 1:5، 21.8±0.61 و برای گروه 1:10، 18.0±1.13 ساعت بود. که بطور کلی در مقایسه با گروه کنترل کاهش معنی دار داشت (p=0.023) و بیشترین تاثیر AWJ در بالاترین غلظت یعنی 1:1 ملاحظه شد. بحث و نتیجه گیری استفاده از کمک‌ محرک‌های مختلف به صورت سلول‌های عرضه‌کننده مصنوعی، می تواند در طراحی محیط‌های کشت انتخابی برای زیر دسته‌های سلولهایT جهت استفاده در روش‌های ایمونوسل‌تراپی آداپتیو سودمند باشد.