ارزیابی تاثیر مهار پمپ افلاکس AdeB با استفاده از پپتید های نوکلئیک اسید اختصاصی در حساسیت به سیپرو فلوکساسین در ایزوله های آسینتوباکتر بومانی مقاوم به سیپروفلوکساسین

Abstract

هدف از اين مطالعه، هدف قرار دادن ژن adeB با آنتی سنس پپتید اسيد نوکلئيك و کاهش مقاومت نسبت به آنتی بیوتیک سیپروفلوکساسین بود. مواد و روش ها: در این تحقیق از پایگاه اطلاعاتی NCBI به منظور طراحی PNA استفاده شد. هدف از این معالعه ژن adeB تا با اتصال PNA به mRNA ژن هدف از ترجمه mRNA جلوگیری کند. سه ایزوله ی بالینی و یک سویه ی استاندارد اسینتوباکتر بومانی 17978ATCC با استفاده از الکتروپوریشن و مستعدسازی در مواجهه با PNA اختصاصی قرار داده شدند. در این مطالعه به منظور بررسی فنوتیپی و تعیین میزان حساسیت باکتری ها نسبت به آنتی بیوتیک های سیپرفلوکساسین ، تتراسایکلین، کولیستین از روش MIC میکرودایلوشن براث استفاده شد. به منظور تایید حضور ژن های ParC , gyrA در ایزوله های بالینی از روش single PCR و به منظور تعیین میزان تغییرات بیان ژن adeB از متد Real time PCRاستفاده شد. یافته ها: نتایج MIC نشان داد مقاومت اسینتوباکتر بومانی در سویه ی استاندارد 17978ATCC نسبت به سیپروفلوکساسین پس از مواجهه با PNA از μg/ml32 به μg/ml16 کاهش یافته بود و همچنین MIC در دو تا ایزوله های بالینی نسبت به آنتی بیوتیک تتراسایکلین از μg/ml32 به μg/ml16 و در ایزوله دیگری MIC از μg/ml128 به μg/ml64 کاهش مقاومت را نشان داد. آنالیز بیان ژن پس از انجام Real time PCR نشان داد که سطح بیان ژن adeB پس از مواجهه با PNA در سویه ی استاندارد اسینتوباکتر بومانی 17978ATCC ( P value کمتر از 05/0) و در سه ایزوله ی بالینی بیان ژن کاهش یافته بود (0.107 (P=.