بررسي فراواني سلول های Treg ، Th17 و T exhausted و فاکتور های اپي ژنتیكي موثر در تكامل سلول های T در افراد مبتلا به شكست مكرر لانه گزيني ( RIF )

Abstract

در این مطالعه به بررسی جمعیت¬های سلولی مختلف از سلول¬های T کمکی نوع 17 (Th17)، T تنظیمی (Treg) و سلول¬های T فرسوده (exhausted T) و T تنظیمی فرسوده(exhausted Treg) و بیان ژن¬های مرتبط و عوامل اپی¬ژنتیکی موثر بر آنها در زنان مبتلا به شکست مکرر لانه گزینی و گروه کنترل پرداخته شد. مواد و روش ها: 40 نفر از افراد مبتلا به RIF دارای اختلالات ایمنی سلولی و 50 نفر از زنان با سابقه بارداری موفق به عنوان گروه کنترل در نظر گرفته شدند. بخشی از خون گرفته شده از افراد برای بررسی¬های فلوسایتومتری و بخشی برای جداسازی سلول¬های تک هسته¬ای خون (PBMC) با استفاده از فایکول 077/1 مورد استفاده قرار گرفت. میزان فراوانی سلول¬های Treg, Th17، exhausted T و exhausted Treg با استفاده از روش فلوسایتومتری بررسی شد. جمعیت سلول¬های PBMCs از نظر میزان بیان ژن¬های مولکول¬های TBX21، GATA3، IRF-4 و GITR با تکنیک Quantitative real-time PCR بررسی شدند. همچنین میزان میکروRNAهای PBMC¬ های خون محیطی و لنفوسیت های T تخلیص شده هم با استفاده از تکنیکQuantitative real-time PCR مورد بررسی قرار گرفت. یافته ها: فراوانی سلول¬های Treg و exhausted T به صورت معنی¬داری در زنان مبتلا به RIF کمتر از زنان نرمال بود (0022/0 و 029/0=P)، در حالیکه تعداد سلول¬های Th17 و exhausted Treg در گروه بیمار بیشتر بود (0048/0 و 0034/0 =P). مقایسه¬ میزان بیان ژن¬های GATA3 و GITR در زنان مبتلا به RIF، نشان¬دهنده¬ی کاهش معنی¬دار بیان به هنگام مقایسه با افراد نرمال بود (0015/0 و 055/0 =P)، در حالیکه سطح بیان ژن¬های TBX21 و IRF-4 در زنان مبتلا بهRIF بیشتر از گروه کنترل بود (013/0 و 0003/0 =P). بررسی mir-106b-25-93، میزان بالاتری از بیان این میکروRNAها را در بیماران در مقایسه با گروه کنترل نشان داد (013/0 و 03/0 و 083/0 =P). بالعکس بیان mir-146a و mir-155 در بیماران کمتر از گروه افراد نرمال بیان شده بود (01/0 و 0006/0 =P)، همچنین تغییر معنی¬داری در میزان بیان mir-326 که میکروRNAی مرتبط با سلول¬های Th17 است، مشاهده گردید (02/0=p).