بررسی جداسازی و تعیین ساختمان آنتی بیوتیک تولید شده توسط سوش استرپتومیسس بومی ایران

Abstract

مراحل جداسازی و خالص سازی سوشاسترپتومیس تولید کننده آنتی بیوتیک با کد 71 در پژوهشکده بیوتکنولوژی سازمان تحقیقات علمی صنعتی ایران انجام پذیرفت. در این مراحل ابتدا نمونه های خاک در محیطهای کشت اختصاصی کشت داده شده اند در نتیجه تنها سویه های اترپتومیس توانایی رشد داشته اند . در مرحله بعدی سویه های استرپتومیس خالص سازی و در محیط کشت اختصاصی تولید آنتی بیوتیک کشت داده شده اند . در نتیجه پس از آزمایشات آنتی بیوگرام بر اساس چهار سوش میکروبی انجام گرفت که برای جداسازی آنتی بیوتیک تولید شده سوش استرپتومیس 71 انتخاب گردید . مراحل جداسازی ابتدا به صورت عصاره گیری با حلالهای مختلف انجام گرفت که عصاره متانولی و عصاره آبی حاوی آنتی بیوتیک بودند در قدم بعدی با روش کاوش نوار ضد رشد Rf تقریبی آنتی بیوتیکهای عصاره متانولی مشخص گردید و سپس با استفاده از کروماتوگرافی ستونی چهار آنتی بیوتیک با Rf های متفاوت جداسازی شد . عمل خالص سازی با TLC پره پاراتیو روی فراکسیونی که از لحاظ وزن بیشترین مقدار را داشت انجام گرفت . اما سرانجام بعلت مقدار کم که تعیین نمودن ساختمان را امکان پذیر نمی ساخت عصاره متانولی کنار گذاشته شد . کروماتوگرافی بر روی عصاره آبی با فاز بالایی سیستم حلال کلروفرم متانول آمونیاک17 ,(112) انجام گرفت که فاز ساکن سیلیکاژل سپس Rf تقریبی آنتی بیوتیک محلول در آب به روش کاهش نوار ضد رشد تعیین شد و جدا سازی TLC پرهپاراتیو انجام گرفت. نوار آنتی بیتیکی با حلال آب مقطر از نوار سیلیکاژل جدا سازی و نوبلور گردید . خصوصیات انحلال ،PH محلول ، عدم جذب در UV و نتایج حاصل از طیف IR بیانگر وجود آنتی بیوتیک با ساختمان آمینوگلیکوزید می باشد . به دلیل محدودیت زمانی تعیین ساختمان نهایی بوسیله دستگاههای طیف سنجی دیگر NMR) و (Mass انجام نگرفت