بررسی اثرات غلظت های مختلف مرفین بر روی میزان دی هیدروتستوسترون، استرادیول و آپوپتوز سلول های بنیادی عصبی مغز جنین رت

Abstract

تا حال حاضر مطالعات زیادی اثرات تحریکی مصرف کوتاه و بلند مدت مرفین، به عنوان یک ضد درد قوی را روی افراد معتاد به اپیوئید¬ها و افزایش کینتیک سلولی، همچنین اثرات متفاوت مرفین روی سلول¬های مختلف را آشکار کرده¬ است.روش¬ها: برای فهم اثر مرفین روی پیش ساز های چند توان عصبی با تاکید بر بیوسنتز اندوژن نورواستروئید¬های وابسته به جنس، سلول¬های بنیادی جدا شده از مغز جنین رت تا 72 ساعت در معرض غلظت¬های 10، 20، 50 و 100 میکرومول مرفین و ترکیب 100 میکرومول مرفین با 100 میکرومول نالوکسان قرار گرفت. همچنین فعالیت فلوسایتومتریک Ki-67 و Annexin V/PI جهت بررسی روند نکروز و آپوپتوز سلول¬های درمان شده، مورد ارزیابی قرار گرفت. سطوح دی¬هیدروتستوسترون و استرادیول در سوپرناتانت این سلول¬ها با استفاده از روش ELISA اندازه گیری شد.یافته¬ها: با توجه به نتایج به دست آمده، کاهش زیست پذیری وابسته به زمان و غلظت سلول-ها هماهنگ با تنظیم کاهشی Ki-67 و تحریک تنظیم افزایشی Annexin Vمی¬باشد. استفاده از 100 میکرومول نالوکسان به عنوان آنتاگونیست مرفین، توانست اثرات مختلف مرفین را معکوس کند. همچنین اثبات شد که در معرض گذاری سلول¬های بنیادی اعصاب با مرفین، همسو با افزایش زمان می¬تواند بیوسنتز اندوژن¬های دی¬هیدروتستوسترون و استرادیول را افزایش دهد. همچنین نالوکسان به صورت قابل توجهی توانست سنتز این نورواستروئید¬ها را به صورت وابسته به زمان کاهش دهد., Up to present, a large number of reports unveiled exacerbating effects of both long- and short-term administration of morphine, as a potent analgesic agent, on opium-addicted individuals and a plethora of cell kinetics, although contradictory effect of morphine on different cells have been introduced until yet.Methods: To understand the effect of morphine on neural multipotent precursors with emphasis on endogenous sex-related neurosteriods biosynthesis, rat neural stem cells isolated from embryonic rat brain to various concentrations of morphine including 10, 20, 50 and 100 M alone or in combination with naloxone (100 M) over period of 72 h. Flow cytometric Ki-67 expression and Annexin-V/PI based necrosis and apoptosis of exposed cells were evaluated. The total content of dihydrotestosterone and estradiol in cell supernatant was measured by ELISA.Results: According on obtained data, both concentration- and time-dependent decrement of cell viability were orchestrated thorough down-regulation of ki-67 and simultaneous the up-regulation of Annexin-V. Addition of naloxone (100 M), as Mu opiate receptor antagonist, could blunt the morphine-induced adverse effects. It also well established that time-course exposure of rat neural stem cells with morphine potently could accelerate the endogenous dihydrotestosterone and estradiol biosynthesis. Interestingly, naloxone could consequently attenuate the enhanced neurosteriodogenesis time-dependently.