تاثیر هیپوکسی برپرولیفراسیون، مرگ سلولی و الگوی متیلاسیون پروموتر ژن های پروآپوپتوتیک و آنتی آپوپتوتیک در سلول MOLT-4 بر بستر سلولهای مزانشیمی مغز استخوان

Abstract

هدف از این مطالعه، بررسی اثر هیپوکسی و MSCها ا بر الگوی متیلاسیون پروموتر ژن¬های BAX و BCL2 می باشد.هم کشتی سلول های MOLT-4 با MSCها و تیمار آن با COCl2 طی زمان های 6، 12 و 24 ساعت انجام شد. شمارش سلول¬ها از طریق رنگ آمیزی با تریپان بلو و بوسیله لام نئوبار انجام گرفت. جهت بررسی وضعیت متیلاسیون ناحیه پروموتر ژن های انتخاب شده از روش MSP استفاده شده است.پروموتر ژن های BAX و BCL2 در سلول های MOLT-4 زمان صفر به ترتیب در شرایط متیلاسیون نسبی و آنمتیله کامل قرار داشتند. این شرایط پس از هم کشتی با MSC ها و قرارگیری تحت هایپوکسی تغییری نشان نداد., DNA methylation has known as a well-studied epigenetic mechanism that is a potent arm of the gene expression controlling machinery. Since the hypoxic situation and various cells of bone marrow microenvironment, e.g. mesenchymal stem cells, have a role in the leukemic cells in-vivo and in-vitro biology, we decided to study the effects of hypoxia and MSCs on the promoter methylation pattern of BAX and BCL2 genes.The co-culture of MOLT-4 cells with MSCs and treatment by COCl2 was done during 6, 12, and 24 hours. Cell counting was done using Trypan Blue and the Neubauer. The MSP assay was used to evaluate the methylation status of the selected genes promoter region. The BAX and BCL2 genes promoters of zero-time MOLT-4 cells were in partial methylated and fully unmethylated modes, respectively. This condition showed no change under the effect of hypoxia and co-culture with MSCs.