ارتباط پلی مورفیسم IVS1-1724 ژن CD46 درزنان با سابقه سقط خود به خود مکرر

Abstract

علل شناخته‌شده و ناشناخته متفاوتی برای بیماری سقط مکرر خود به خود وجود دارد. از این میان پروتئین تنظیم‌کننده کمپلمان CD46; نقش مهمی در جلوگیری از فعالیت کنترل نشده کمپلمان و ادامه موفقیت‌آمیز حاملگی دارد . ما در این مطالعه موفق شدیم ارتباط پلی مورفیسم CD46 ; IVS1-1724 C>G با بیماری سقط مکرر خودبه‌خودرا در زنان ایرانی بررسیکنیم. موادوروش‌ها:141زن با سقط مکرر و153 زن با حاملگی نرمال در این مطالعه وارد شدند. RSAبه‌عنوان حداقل سه سقط پیدرپی بدون هر گونه علت ایمونولوژیکی ، پاتولوژیکی و ژنتیکی میباشد.یک میلی از خون محیطی در تیوب های حاوی ضد انعقاد اتیلن دی آمینو اتیل تترا استیک اسید(EDTA) جمع آوری شد. روش استاندارد رسوب با نمک برای استخراج DNAبه کار رفت و همه DNA های استخراج شده تا زمان تعیین ژنوتیپ در 20- درجه ذخیره شد. DNAژنومی استخراج شد و آزمون RFLPPCR/ با به کار بردن جفت پرایمرهای مخصوص و آنزیم محدودالاثر Hind III انجام شد. آنالیز آماریبرای محاسبه فراوانی ژنوتیپ ها و آلل ها و همچنین ( Odds Ratio (OR شد.یافته‌ها:یک باند مشخص در موقعیتbp 243 درنتایج الکتروفورز محصولات PCRنمایان شد. دایجست محصولات PCRبا آنزیم اندونوکلئاز محدودالاثر HindIII سه الگوی دایجست مطابق با سه ژنوتیپ متفاوت را نشان داد. نتایجآماریاختلافمعنیداریدرتوزیعژنوتیپ‌هادردوگروه بیماروکنترلنشان نداد. اگرچه آلل G در گروه سالم به‌طور مشخص زیاد بود و به‌عنوان آلل محافظت‌کننده در نظر گرفته شد (p=0.04, OR=0.8). , There are several known and unknown factors for recurrent spontaneous abortion (RSA). Of them, complement regulatory protein CD46 (MCP) plays pivotal role in preventing uncontrolled activation of complement and continuing successful pregnancy. We aimed in this study to investigate possible association of CD46 IVS1-1724 C>G polymorphism with in Iranian women Recurrent spontaneous abortion. Methods: 141 women with RSA and 153 women with normal pregnancy were enrolled in this study. Recurrent spontaneous abortion was confirmed as at least three consecutive abortions without any known immunologic, pathologic and genetic reason.One ml peripheral whole blood was collected in tubes containing Ethylene DiamineTetraacetic Acid (EDTA) anti-coagulant. Standard salting out method was used to extract genomic DNA, and all DNAs were stored at -20°C until genotyping.Genomic DNA was extracted and RFLP-PCR was done using specific primer pair and HindIII restriction enzyme. Statistical analysis was done for genotype and allele frequency, and also for Odds Ratio (OR).Results: Specific 243 bp bound was appeared in PCR product electrophoresis results. Digestion of PCR products by HindIII restriction endonuclease revealed three digestion patterns corresponding to the three different genotypes .Statistical analysis showed no significant difference in genotype frequency between two RSA and normal groups. However, G allele was significantly more frequent in fertile women and represented as protective allele (p=0.04, OR=0.8).