شناسایی آمیب آزادزی آکانتامبا در نمونه¬های آب جمع¬آوری شده از شهرستان میاندوآب با روش واکنش زنجیره¬ای پلی¬مراز

Abstract

آکانتامبا به عنوان یک تک یاخته انگلی فرصت طلب می¬تواند در آب تازه، آب¬های ساحلی و بطری¬های آب معدنی، محلول¬های لنز تماسی و خاک پیدا شود. هدف از مطالعه¬ی حاضر تعیین حضور آکانتامبا بر اساس روش مولکولی در منابع آبی مختلف در استان آذربایجان غربی، شمال غربی ایران که در مرز کشور عراق واقع شده است.روش کار و مواد: در این مطالعه ی بررسی مقطعی، 60 نمونه آب از رودخانه و آب لوله کشی طی خرداد تا شهریور1393 جمع آوری شد. نمونه های آب به وسیله ی فیلتر نانو¬سلولزی فیلتراسیون شد و سپس مواد جداسازی شده بر روی محیط کشت 5/1 درصد آگار غیرمغذی با اضافه کردن اشرشیا کلای کشته شده توسط شعله کشت داده شد. DNA های استخراج شده و تکثیر پیدا کرده را توسط بخش 18S rRNA برای تعیین گونه و آنالیز فیلوژنیک استفاده شد. یافته ها: بیست وهفت (45 درصد) از 60 نمونه آب در مرحله آزمایشات کشت و مورفولوژی آکانتامبا مثبت گزارش شد. همچنین بیست و چهار (40 درصد) از بیست وهفت نمونه مثبت روش کشت توسط PCR، آکانتامبا بودن آنها تایید شد. تمامی نمونه های مثبت مربوط به رودخانه بودند و نمونه مثبت در نمونه آب لوله کشی مشاهده نشد. , Acanthamoeba spp., as free-living opportunistic protozoan parasites can be found in tap, fresh, coastal and bottled mineral waters, contact lens solutions and soil. The present study aimed to determine the Acanthamoeba spp. on the basis of their molecular aspects in different water sources of West Azerbaijan province, Northwest Iran where located with co border of Iraq country.Materials and Methods: In this cross-sectional study, 60 water samples were collected from rivers and tap waters during June to September 2014. The water samples were filtered through cellulose nitrate filter, and then the isolated materials were cultured on 1.5% non-nutrient agar medium seeded with heat-killed Escherichia coli. The extracted DNAs were amplified and sequenced using partial 18S rRNA in order to genotyping and phylogenetic analyses.Results: Twenty seven (45%) out of 60 water samples were positive to Acanthamoeba spp. using both culture growth and morphological examinations. In addition, 24 (40%) out of 27 positive samples in culture method were confirmed by PCR to be Acanthamoeba spp. Fifteen of the PCR-confirmed positive samples were taken from Simineh Rud river and nine samples were taken from Zarineh Rud river. All of the positive samples were from the rivers and the amoeba was not observed in the any of the tap water samples.